ICS67.120 DB34 X 04 安徽省地方标准 DB 34/T 1373—2011 动物组织中氯丙嗪的残留测定 —酶联免疫吸附法 Determination of Chlorpromazine in Animal tissue Enzyme Linked immunosorbent assay 2011-03-16发布 2011-04-16实施 安徽省质量技术监督局发 布   DB34/T 1373—2011 前言 本标准按照 GB/T 1.1-2009 给出的规则起草。 本标准由安徽省畜牧兽医局提出。 本标准由安徽省农业标准化技术委员会归口。 本标准起草单位：安徽省兽药饲料监察所(安徽省畜产品质量安全检测中心)。 本标准主要起草人：汤春莲、许世富、李珲、丁作坤、陶小平、陈文帮。 I   DB34/T 1373—2011 动物组织中氯丙嗪的残留测定—酶联免疫吸附法 1范围 本标准规定了猪、牛、鸡肌肉和肝脏中氯丙嗪的残留测定-酶联免疫吸附测定方法。 本标准适用于猪、牛、鸡肌肉和肝脏中氯丙嗪的残留常规快速测定，阳性样品需用气相色谱—质谱 法（GC/MS）确证。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T 6682分析实验室用水规格和试验方法 3试样制备 采集的动物组织应保存于 -18℃ 的冰柜中，用前恢复至室温，备用。 4原理 本方法是酶联免疫法中的竞争性测定法，其主要原理是：样品中游离的氯丙嗪与酶标板上固定的氯 丙嗪抗原竞争特异性抗体再通过酶标Ⅱ抗的反应，洗掉游离的酶标物，再通过酶的专一性显色剂显色， 根据显色的深浅来判断样品中氯丙嗪的含量，根据竞争性原理，样品中游离的氯丙嗪少，则酶标Ⅱ抗结 合多，显色就深，相反，则显色浅。 结果可以通过在 450nm 处测定吸收值计算，颜色变化的程度反映样品中氯丙嗪的含量，在一定浓 度范围内吸光度的高低与样品中氯丙嗪的含量成反比。 5试剂和材料 5.1除非另有说明，本法所用试剂均为分析纯，水符合 GB/T 6682 二级水的规定。 5.2竞争酶标免疫法氯丙嗪试剂盒，2℃～8℃ 冰箱中保存。 5.2.1微孔板：包被有氯丙嗪抗原。 5.2.2氯丙嗪标准溶液：0 ng/mL、0.1 ng/mL、0.3 ng/mL、0.6 ng/mL、1.25 ng/mL、5.00 ng/mL。 5.2.3酶标物冻干粉：1 瓶。 5.2.4酶标物稀释液：13 mL，1瓶。 5.2.5酶标物溶液：临用前取酶标物冻干粉，准确加入酶标物稀释液 12 mL，摇匀。 5.2.6显色剂：13 mL，1 瓶。 5.2.7终止液：13 mL，1 瓶。 5.3样品稀释液：用水 10 倍稀释厂商提供的浓缩样本稀释液。 1