ICS67.120 DB34 X 04 安徽省地方标准 DB 34/T 1372—2011 动物组织中泰乐菌素的残留测定 —酶联免疫吸附法 Determination ofTylosin residues in animal derived food by Enzyme Linked immuno sorbent assay 2011-03-16发布 2011-04-16实施 安徽省质量技术监督局发 布   DB34/T 1372—2011 前言 本标准按照 GB/T 1.1-2009 给出的规则起草。 本标准由安徽省畜牧兽医局提出。 本标准由安徽省农业标准化技术委员会归口。 本标准起草单位：安徽省兽药饲料监察所(安徽省畜产品质量安全检测中心)。 本标准主要起草人：陈文帮、丁作坤、陶小平、吴昊、许世富、汤春莲、李珲。 I   DB34/T 1372—2011 动物组织中泰乐菌素的残留测定 —酶联免疫吸附法 1范围 本标准规定了猪、牛、鸡、鸭的肌肉、肝脏组织中泰乐菌素的残留测定制样和酶联免疫吸附测定方 本标准适用于猪、牛、鸡、鸭的肌肉、肝脏组织中泰乐菌素的残留常规快速测定，阳性样品需用液 法。 相色谱法（HPLC）或液相色谱质谱法（LC/MS-MS）确证。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T 6682分析实验室用水规格和试验方法 3试样制备 采集的动物性组织，匀浆后 -18℃ 保存备用。 4原理 本方法是酶联免疫法中的竞争性测定法，其主要原理是：样品中游离的泰乐菌素与酶标板上固定的 泰乐菌素抗原竞争特异性抗体，通过酶标Ⅱ抗的反应，洗掉游离的酶标物，再通过酶的专一性显色剂显 色，根据显色的深浅来判断样品中泰乐菌素的含量。根据竞争性原理，样品中游离的泰乐菌素少，则酶 标Ⅱ抗结合多，显色就深，相反，则显色浅。结果可以通过在 450nm 处测定吸收值计算，颜色变化的 程度反映样品中泰乐菌素的含量，在一定浓度范围内吸光度的高低与样品中泰乐菌素的含量成反比。 5试剂和材料 5.1除非另有说明，本法所用试剂均为分析纯，水为符合 GB/T 6682 规定的二级水。 5.2竞争酶标免疫法泰乐菌素试剂盒，2℃～8℃ 冰箱中保存。 5.2.1微孔板：包被有泰乐菌素抗原。 5.2.2泰乐菌素标准溶液：0 ng/mL、200 ng/L、625 ng/L、2.5 ng/mL、10 ng/mL、50 ng/mL。 5.2.3泰乐菌素酶标Ⅱ抗工作液。 5.2.4泰乐菌素抗体工作液。 5.2.5浓缩样品稀释液。 5.2.6浓缩洗涤液。 5.2.7底物A液。 1