中华人民共和国国家标准GB5009.118—2016食品安全国家标准食品中 T-2毒素的测定2016-12-23发布2017-06-23实施中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会国家食品药品监督管理总局发布GB5009.118—2016前言本标准代替/—《谷物中T-2毒素的测定》/—《食品中T-2毒GBT23501 2009GBT5009.118 2008素的测定免疫亲和层析净化高效液相色谱法》SN/T1771—2006《进出口粮谷中T-2毒素的测定免疫亲和柱-液相色谱法》SN/T2676—2010《进出口粮谷中 T-2毒素的检测方法 酶联免疫吸附法 》本标准与 /GBT5009.118—2008相比,主要变化如下 :———标准名称修改为 “食品安全国家标准 食品中T-2毒素的测定”;———增加了适用范围 ;———增加了直接 ELISA法二ⅠGB5009.118—2016食品安全国家标准食品中 T-2毒素的测定范围1本标准规定了食品中 T-2毒素的测定方法 本标准第一法适用于粮食及粮食制品,酒类,酱油醋酱及酱制品中 T-2毒素含量的测定 ,第二法第三法适用于粮食及粮食制品中 T-2毒素的测定第一法免疫亲和层析净化液相色谱法原理2用提取液提取试样中的 T-2毒素,经免疫亲和柱净化 衍生后,用高效液相色谱荧光检测器测定,外标法定量试剂和材料3除非另有说明 ,本方法所用试剂均为分析纯 ,水为GBT6682/ 规定的一级水试剂3.1甲醇():色谱纯CHOH33.1.13.1.23.1.3乙腈( ):色谱纯CHCN3甲苯(CHCH):色谱纯36 53.1.4 4-二甲基氨基吡啶 3.1.5 1-蒽腈(1-anthroylnitrile1-AN,)试剂配制3.2提取液:甲醇-水(8∶2,体积比)3.2.13.2.2 4-二甲基氨基吡啶溶液 :准确称取0.0325g4-二甲基氨基吡啶于 100mL容量瓶中,用甲苯定容至刻度3.2.3 1-蒽腈溶液:准确称取0.030g1-蒽腈于100mL容量瓶中,用甲苯定容至刻度标准品3.3T-2毒素(CH O CAS21259-20-1):纯度≥98.0%,或经国家认证并授予标准物质证书的标号:,24 349准物质标准溶液配制3.4标准储备液:准确称取适量的T-2毒素标准品(精确至0.0001g),用乙腈溶解,配制成浓度为3.4.11GB5009.118—2016/的标准储备液 ,-18℃以下避光保存 100μgmL标准工作液:根据需要准确吸取适量的标准储备液,用乙腈稀释,配制成5ngmL10ngmL/ /3.4.2/ / /50ngmL100ngmL200ngmL的标准工作液 ,4℃避光保存材料3.53.5.1 T-2毒素免疫亲和柱 :柱规格1mL或3mL,柱容量≥1500ng,或等效柱3.5.2玻璃纤维滤纸 :直径11cm,孔径1.5μm,无荧光特性仪器和设备4高效液相色谱仪 :配有荧光检测器 4.14.2高速粉碎机:转速≥12000r/min4.3均质器:转速≥12000r/min氮吹仪4.44.54.64.7离心机涡旋混合仪空气压力泵4.8试验筛:孔径1.0mm4.9天平:感量0.0001g和0.01g4.10超声波发生器 :功率>180W玻璃注射器:10mL4.11分析步骤5提取5.1粮食及粮食制品5.1.1将样品研磨,硬质的粮食等用高速粉碎机磨细并通过试验筛称取25.0g(精确到0.1g)过筛样品于容量瓶中,用提取液定容至 100mL,转移至均质杯中 ,以均质器高速搅拌提取 2min,定量滤纸过滤 移取10.0mL滤液加入40mL水稀释混匀,经玻璃纤维滤纸过滤至滤液澄清 ,滤液备用酱油醋酱及酱制品5.1.2称取25.0g(精确到0.1g)混匀的试样,用甲醇定容至50.0mL,超声提取10min,定量滤纸过滤移取10.0mL滤液加入40mL水稀释混匀,经玻璃纤维滤纸过滤至滤液澄清 ,滤液备用酒类5.1.3取脱气酒类试样 (含二氧化碳的酒类使用前先置于 4℃冰箱冷藏30min,过滤或超声脱气)或其他0.1g 50mL容量瓶中,用甲醇定容至刻度,摇匀,定量滤纸不含二氧化