中华人民共和国国家标准GB5009.89—2016食品安全国家标准食品中烟酸和烟酰胺的测定2016-12-23发布2017-06-23实施中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会国家食品药品监督管理总局发布GB5009.89—2016前言本标准代替 /—《食品中烟酸的测定》GB5413.15—2010《食品安全国家标准—《肉与肉制品维生素PP 含量测GBT5009.89 2003婴幼儿食品和乳品种烟酸和烟酰胺的测定》和/GBT9695.25 2008定》本标准与GB5413.15—2010相比,主要变化如下 :———标准名称修改为 “食品安全国家标准 食品中烟酸和烟酰胺的测定 ”;———调整了试剂顺序和格式 ;———修改并细化了适用于不同食品种类的前处理方法(第一法);———增加了标准溶液浓度校正方法 (第二法);———重新评估了检出限 ,增加了定量限 ⅠGB5009.89—2016食品安全国家标准食品中烟酸和烟酰胺的测定范围1本标准规定了食品中烟酸和烟酰胺的测定方法本标准第一法为微生物法 ,适用于各类食品包括以天然食品为基 质的强化食品中烟酸和烟酰胺总量的测定;第二法为高效液相色谱法 ,适用于强化食品中烟酸和烟酰胺的测定第一法微生物法原理2烟酸(烟酰胺)是植物乳杆菌Lactobacillsplantar m(ATCC8014)生长所必需的营养素, 在一定μμ控制条件下,利用植物乳杆菌对烟酸和烟酰胺的特异性,在含有烟酸和烟酰胺的样品中生长形成的光密度来测定烟酸和烟酰胺的含量 试剂和材料3除非另有说明 ,本方法所用试剂均为分析纯,水为GBT6682/规定的二级水培养基可购买符合测试要求的商品化培养基 菌种3.13.2植物乳杆菌试剂Lactobacillsplantarμm(ATCC8014),或其他有效标准菌株 μ盐酸(HCl)3.2.13.2.23.2.33.2.43.2.5氢氧化钠(NaOH)氯化钠(NaCl)浓硫酸( )HSO24乙醇()CHOH2 5试剂配制3.33.3.1盐酸溶液(1molL/):吸取83mL盐酸,于1000mL烧杯中,加917mL水,混匀3.3.2盐酸溶液(0.1molL/):吸取盐酸溶液(3.3.110mL) ,加水溶解至100mL氢氧化钠溶液(1molL/):称取40g氢氧化钠于1000mL烧杯中,加水溶解并稀释至1000mL,混匀3.3.31GB5009.89—20163.3.4氢氧化钠溶液(0.1molL/):吸取氢氧化钠溶液 (3.3.310mL),加水溶解至100mL3.3.5生理盐水(0.9%):称取9g氯化钠,溶解于1000mL水中,分装10mL于试管中,15min,备用乙醇溶液(25%):量取200mL无水乙醇与800mL水混匀灭菌121℃3.3.63.3.7硫酸溶液(1molL/):于2000mL烧杯中先注入700mL水,吸取56mL硫酸沿烧杯壁缓慢倒入水中,用水稀释到1000mL培养基3.43.4.1乳酸杆菌琼脂培养基:可按A.1配制3.4.2乳酸杆菌肉汤培养基:可按A.2配制3.4.3烟酸测定用培养基:可按A.3配制注:一些商品化合成培养基效果良好,商品化合成培养基按标签说明进行配制标准品3.53.6烟酸():纯度≥99.5%,或经国家认证并授予标准物质证书的标准物质2CHNO6 5标准溶液配制3.6.1烟酸标准储备液(0.1mgmL/ ):精确称取50.0mg烟酸标准品,用乙醇溶液溶解并移至500mL容量瓶中,定容,混匀于2℃~4℃冷藏此溶液每毫升相当于100μg烟酸烟酸标准中间液 ( / ):准确吸取1.0mL1gmLμ烟酸标准储备液 (3.6.1)置于100mL棕色容量瓶3.6.2中,用乙醇溶液稀释并定容至刻度 ,混匀于2℃~4℃冷藏此溶液每毫升相当于1μg烟酸3.6.3烟酸标准工作液(100ngmL/ ):准确吸取5.00mL烟酸标准中间液(3.6.2)置于50mL 容量瓶中,用水稀释定容至刻度 ,混匀于2℃~4℃冷藏此溶液每毫升相当于100ng烟酸仪器和设备44.1天平:感量分别为0.01g和0.1mg均质设备:用于试样的均质化 4.24.34.44.54.6恒温培养箱:36℃±