ICS 13.100C52中华人民共和国国家职业卫生标准GBZ/T 312—2018尿中N-甲基乙酰胺的测定气相色谱法Determination of N-methylacetamide in urine—Gas chromatographic method2018-08 - 16发布2019 - 01 - 01实施中华人民共和国国家卫生健康委员会发布GBZ/T 312—2018前言根据《中华人民共和国职业病防治法》制定本标准本标准按照GB/T 1.1—2009给出的规则起草本标准起草单位：浙江省医学科学院浙江省疾病预防控制中心广东省职业病防治院上海市疾病预防控制中心本标准主要起草人：钱亚玲唐红芳阮征王晗朱海豹刘丹华吴邦华温忆敏赵永信IGBZ/T 312—2018尿中N-甲基乙酰胺的测定气相色谱法12范围本标准规定了测定尿中N-甲基乙酰胺的气相色谱法本标准适用于职业接触人员尿中N-甲基乙酰胺的测定规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的凡是注日期的引用文件仅注日期的版本适用于本文件凡是不注日期的引用文件其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件GBZ/T 295WS/T 97WS/T 98职业人群生物监测方法总则尿中肌酐分光光度测定方法尿中肌酐的反相高效液相色谱测定方法3原理尿液样品（以下称尿样）经冷冻离心甲醇沉淀蛋白后用极性毛细管色谱柱分离尿中的N-甲基乙酰胺经氮磷检测器检测以保留时间定性峰面积定量4仪器4.14.24.34.44.5具盖聚乙烯塑料瓶：50mL具盖聚乙烯塑料离心管：5mL10mL离心机：5000r/min微量注射器：1μL气相色谱仪具氮磷检测器自动进样器仪器操作参考条件：a)色谱柱：30 m×0.53 mm×1.0μm键合/交联聚乙二醇(PEG-20M)；b)柱温：初温 100℃保持 1min以 25℃/min升温至170℃保持 3min以 10℃／min升温至210℃保持 3min；汽化室温度：250℃；检测室温度：320℃；载气(氮气)流量：6.0 mL/min；分流比：10:1c)d)e)f)5试剂5.15.2实验用水：色谱鉴定无干扰杂峰甲醇溶液：80％（体积分数）色谱鉴定无干扰杂峰1GBZ/T 312—20185.3标准溶液：准确称取一定量的 N-甲基乙酰胺（含量≥99%用温水溶化后吸取）用甲醇溶液稀释并定容到一定体积制成标准贮备液置于 4℃冰箱中保存备用临用时用甲醇溶液稀释成浓度为1.00 mg/mL的标准应用液①和浓度为0.020mg/mL的标准应用液②6样品的采集运输和保存用具盖聚乙烯塑料瓶收集职业接触二甲基乙酰胺劳动者工作周末的班末尿 50mL旋紧瓶盖后于室温下运输置-18℃冰箱中存放可保存两周7分析步骤7.1空白检查：取 1.0mL水移至5mL具塞离心管中加甲醇溶液4.0mL混匀后供测定色谱鉴定应无干扰杂峰7.2样品处理：将冰冻尿样放置在室温解冻后混匀取 10mL尿液置于10mL具塞离心管中以 3000r/min离心10min准确吸取上清液 1.0mL移至5mL具塞离心管中加入甲醇溶液4.0mL混匀再以3000 r/min离心10min上清液供测定7.3标准曲线绘制：于 10 mL容量瓶中准确加入0.0 mL0.10mL0.20mL1.00mL的标准应用液②和 0.10mL0.50mL的标准应用液①加水2.0mL用甲醇溶液定容到刻度配制成浓度为 0.0μg/mL0.20μg/mL0.40μg/mL2.00μg/mL10.0μg/mL50.0μg/mL的N-甲基乙酰胺标准系列；参照仪器操作条件将气相色谱仪调节至最佳测定状态分别进样 0.2μL测定各标准系列每个浓度重复测定 3次以保留时间定性以 N-甲基乙酰胺的浓度（μg/mL）为横坐标测得的峰面积均值为纵坐标绘制标准曲线或计算回归方程7.4样品测定：用测定标准系列的操作条件测定尿样上清液溶液测得的样品峰面积值由标准曲线或回归方程得到样品溶液中 N-甲基乙酰胺的浓度（μg/mL）若样品中 N-甲基乙酰胺浓度超过测定范围可用甲醇溶液稀释后测定计算时乘以稀释倍数8计算8.1按式（1）计算尿中N-