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SNT_0973-2010进出口肉、肉制品及其他食品中肠出血性大肠杆菌O157:H7检测方法PDF

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进出口 SNT
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更新时间:2022/4/16(发布于辽宁)

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文本描述
中 华 人 民 共 和 国 出 入 境 检 验 检 疫 行 业 标 准! "!"#!"#$ %!&!代 替!!"#$%&'($$$进 出 口 肉肉 制 品 及 其 他 食 品#中 肠 出 血 性 大 肠 杆 菌检 测 方 法$$&'#%#&'(')*+,-(+.,./',(').01'*.))1-2+3$!!)"#$%$&'#%#+,*'-(4*'-(5).673(-,6.(1')/..6/.)+*5.)(-,6'85.)(%!&!0&&0!&发 布%!&&0!'0!&实 施中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局发布 犛犖/犜0973 —2010前言本 标 准 按 照 GB/T1.1—2009 给 出 的 规 则 起 草。本 标 准 代 替SN/T0973 —2000 《进 出 口 肉 及 肉 制 品 中 肠 出 血 性 大 肠 杆 菌O157 :H7 检 测 方 法》。本 标 准 与 SN/T0973 —2000相 比 ,主 要 技 术 变 化 如 下:——— 补 充 了 方 法 快 速 检 测 肠 出 血性 大 肠 杆 菌ELISAO157 :H7 的 内 容;——— 补 充 了 微 生 物 遗 传 分 子 特 征 性 鉴 定 技 术 (基 因 分 型 )内容 ,便 于 对 该 危 害 性 致 病 菌 的 溯 源性 调查 和 变 异 性 研 究。本 标 准 由 国 家 认 证 认 可 监 督 管 理 委 员 会 提 出 并 归 口。本 标 准 起 草 单 位 :中 华 人 民 共 和 国 上 海 出入 境 检 验 检 疫 局 、中 华 人 民 共和 国 深 圳 出 入 境 检 验 检 疫局 、3M中 国 有 限 公 司 、生 物 梅 里 埃 (中 国 )公 司。本 标 准 主 要 起 草 人 :张 树 宏 、顾 鸣 、韩 伟 、杨 捷 琳 、范 放 、吕敬 章 、万 志 刚 、吕 雷 、朱 贻 华 、刘 毅。本 标 准 所 代 替 标 准 的 历 次 版 本 发 布 情 况 为:——— SN/T0973 —2000 。Ⅰ 犛犖/犜0973 —2010进 出 口 肉 、肉 制 品 及 其 他 食 品中 肠 出 血 性 大 肠 杆 菌犗157 :犎7 检 测 方 法范 围1本 标 准 规 定 了 进 出 口 肉 及 肉 制 品 中 肠 出 血 性 大 肠 杆 菌O157 :H7 的 检 测 方 法。本 标 准 适 用 于 进 出 口 肉 、肉 制 品 及 其 他 食 品 中 的 肠 出 血 性 大 肠 杆 菌O157 :H7 的 定 性 检 验。定 义 和 术 语2下 列 术 语 和 定 义 适 用 于 本 文 件。2.1肠 出 血 性 大 肠 杆 菌犗157 :犎7犲狀狋犲狉狅犺犲犿狅狉狉犺犪犵犻犮 犈 .犆狅犾犻 犗157 :犎7本 细 菌 为 需 氧 或 兼 性 厌 氧 、革 兰 氏 阴 性 ,有 周 鞭 毛 ,并 有 菌 毛 ,不 产生 芽 孢 ,发 酵 乳 糖 ,不 发 酵 或 迟 缓发 酵 山 梨 醇 ,氧 化 酶 阴 性 ,葡 萄 糖 苷 酶 阴 性 的 杆 菌。β方 法 原 理3采 用 Tecra 微 孔 板 法 大 肠 杆 菌O157 :H7 快 速 检 测 试 剂盒 方 法 1)。 样 品 增 菌液 煮 沸 裂 解 ,裂 解 液 与特 异 性 抗 体 (一 抗 )包 被 的 微 孔 板 杂 交 后 ,用 酶 标 抗 体 (二 抗 )再杂 交 ,然 后 与 特 定 底 物 反 应 生 成 有 色 化 合物 ,利 用 肉 眼 或 酶 标 仪 进 行 检 测。设 备 和 材 料44.1 恒 温 培 养 箱 :(10 ℃ ~50℃ )±1℃。4.2 均 质 器 :小 于 12 000 r/min。高 压 灭 菌 锅。4.3科 玛 嘉 大 肠 杆 菌 O157 :H7显 色 琼 脂 平 板 2)。4.4VID AS 自 动 酶 联 免 疫 检 测 仪 ,法 国 梅 利埃 公 司 产 品 或 其 他 等 效 产 品 3)。4.5自 动 微 生 物 生 化 鉴 定 仪 或 其 他 等 效 产 品3)。4.6 VITEK微 生 物 实 验 室 通 用 玻 璃 器 皿 、移 液 管 、玻 皿 等。4.74.8 铂 铱 或 镍 铬 丝 接 种 环 ,直 径 约 3 m m ;玻 璃棒。L1)、2) 分 别 为 由 美 国 3M公 司 和 法 国 科 玛 嘉 公 司 提 供 的 产 品 的 商 品 名 。 给 出 这一 信 息 是 为 了 方 便 本 标 准 的 使 用者 ,并 不 表 示 对 该 产 品 的 认 可 。 如 果 其 他 等 效 产 品 具 有 相 同 的 效 果 ,则 可 使 用 这 些 等 效 的 产 品。3)由 法 国 生 物 梅 里 埃 公 司 提 供 的 产 品的 商 品 名 。 给 出 这 一 信 息 是 为 了 方 便 本 标 准 的 使 用 者 ,并不 表 示 对 该 产 品的 认 可 。 如 果 其 他 等 效 产 品 具 有 相 同 的 效 果 ,则 可 使 用 这 些 等 效 的 产 品。1 犛犖/犜0973 —20104.9 电 子 天 平 :精 确 值 0.001 g。4.10 移 液 枪 及 枪 头 :1 mL 、0.2mL。洗 板 机。4.114.12 酶 标 仪 (波 长 450 nm)。培 养 基 和 试 剂5除 另 有 说 明 外 ,所 用 试 剂 均 为 分 析 纯 ,水 为 蒸 馏 水 (Tecra 法 试 剂的 配 制 使 用 重 蒸 水)。改 良E .C 新 生 霉 素 增 菌 肉 汤 [m (EC )n]:见 附 录中A .1。5.1A5.2 山 梨 醇 麦 康 凯 琼 脂 (SM AC ):见 附 录A中A .2。M UG 肉 汤 (LSTM UG ):见附 录Tecra T M 微 孔 板 法