中华人民共和国国家标准GB 4789.40—2010食品安全国家标准 食品微生物学检验 阪崎肠杆菌检验 National food safety standard Food microbiological examination：Enterobacter sakazakii2010-03-26发布2010-06-01实施中 华 人 民 共 和 国 卫 生 部 发布 GB4789.40—2010前言本标准代替 GB/T 4789.40-2008《食品卫生微生物学检验阪崎肠杆菌检验》。本标准与 GB/T 4789.40-2008相比，主要变化如下：——修改了标准的中英文名称；——删除了附录 A中 A.3。本标准的附录 A、附录 B为规范性附录。本标准所代替的历次版本发布情况为：——GB/T 4789.40-2008。I? GB4789.40—2010食品安全国家标准食品微生物学检验阪崎肠杆菌检验1范围本标准规定了食品中阪崎肠杆菌（Enterobacter sakazakii）的检验方法。本标准适用于婴幼儿配方食品、乳和乳制品及其原料中阪崎肠杆菌的检验。2设备和材料除微生物实验室常规灭菌及培养设备外，其他设备和材料如下：2.12.22.32.42.52.62.72.82.92.102.11恒温培养箱：25℃±1℃，36℃±1℃，44℃±0.5℃。冰箱：2℃～5℃。恒温水浴箱：44℃±0.5℃。天平：感量 0.1 g。均质器。振荡器。无菌吸管：1 mL（具 0.01 mL刻度）、10mL（具 0.1 mL刻度）或微量移液器及吸头。无菌锥形瓶：容量 100 mL、200 mL、2000 mL。无菌培养皿：直径 90 mm。pH计或pH比色管或精密pH试纸。全自动微生物生化鉴定系统。3培养基和试剂3.13.2缓冲蛋白胨水（buffer peptone water，BPW）：见附录 A中A.1。改良月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤-万古霉素（modified lauryl sulfate tryptose broth-vancomycinmedium，mLST-Vm）：见附录 A中A.2。阪崎肠杆菌显色培养基。3.33.43.53.63.7胰蛋白胨大豆琼脂（trypticase soy agar，TSA）：见附录 A中A.3。生化鉴定试剂盒。氧化酶试剂：见附录 A中A.4。L-赖氨酸脱羧酶培养基：见附录 A中A.5。1 GB4789.40—20103.83.9L-鸟氨酸脱羧酶培养基：见附录 A中A.6。L-精氨酸双水解酶培养基：见附录 A中A.7。3.10糖类发酵培养基：见附录 A中A.8。3.11西蒙氏柠檬酸盐培养基：见附录 A中A.9。2 GB4789.40—2010第一法 阪崎肠杆菌的检验4检验程序阪崎肠杆菌检验程序见图 1。检样 100 g（mL）+BPW稀释液900 mL36 ℃±1 ℃，18 h±2 h1 mL + mLST-Vm 10 mL44 ℃±0.5 ℃，24 h±2 h阪崎肠杆菌显色培养基36 ℃±1 ℃，24 h±2 h挑取疑似菌落TSA25 ℃±1 ℃，48 h±4 h挑取黄色菌落生化鉴定报告图1 阪崎肠杆菌检验程序5操作步骤5.1前增菌和增菌取检样 100 g（mL）加入已预热至 44℃装有900 mL缓冲蛋白胨水的锥形瓶中，用手缓缓地摇动至充分溶解，36℃±1℃培养 18 h±2 h。移取 1 mL转种于10 mL mLST-Vm肉汤，44℃±0.5℃培养24 h±2h。5.2分离5.2.1轻轻混匀 mLST-Vm 肉汤培养物，各取增菌培养物 1环，分别划线接种于两个阪崎肠杆菌显色3