文本描述
中华人民共和国国家标准GB 4789.4—2010食品安全国家标准 食品微生物学检验 沙门氏菌检验 National food safety standard Food microbiological examination: Salmonella2010-03-26发布2010-06-01实施中 华 人 民 共 和 国 卫 生 部 发布 GB4789.4—2010前言本标准代替 GB/T 4789.4-2008《食品卫生微生物学检验沙门氏菌检验》。本标准与 GB/T 4789.4-2008相比,主要变化如下:——修改了标准的中英文名称;——修改了标准的范围;——修改了培养基和试剂;——修改了设备和材料;——修改了附录 A。本标准的附录 A、附录 B为规范性附录。本标准所代替的历次版本发布情况为:——GB 4789.4-84、GB 4789.4-1994、GB/T 4789.4-2003、GB/T 4789.4-2008。I? GB4789.4—2010食品安全国家标准食品微生物学检验沙门氏菌检验1范围本标准规定了食品中沙门氏菌(Salmonella)的检验方法。本标准适用于食品中沙门氏菌的检验。2设备和材料除微生物实验室常规灭菌及培养设备外,其他设备和材料如下:2.1冰箱:2℃~5℃。2.2恒温培养箱:36℃±1℃,42℃±1℃。2.3均质器。2.4振荡器。2.5电子天平:感量 0.1 g。2.6无菌锥形瓶:容量 500 mL,250 mL。2.7无菌吸管:1 mL(具 0.01 mL刻度)、10mL(具 0.1 mL刻度)或微量移液器及吸头。2.8无菌培养皿:直径 90 mm。2.9无菌试管:3 mm×50 mm、10 mm×75 mm。2.10无菌毛细管。2.11pH计或pH比色管或精密pH试纸。2.12全自动微生物生化鉴定系统。3培养基和试剂3.1缓冲蛋白胨水(BPW): 见附录 A中A.1。3.2四硫磺酸钠煌绿(TTB)增菌液:见附录 A中A.2。3.3亚硒酸盐胱氨酸(SC)增菌液:见附录 A中A.3。3.4亚硫酸铋(BS)琼脂:见附录 A中A.4。3.5HE琼脂:见附录A中A.5。3.6木糖赖氨酸脱氧胆盐(XLD)琼脂:见附录 A中A.6。1 GB4789.4—20103.7沙门氏菌属显色培养基。3.8三糖铁(TSI)琼脂:见附录 A中A.7。蛋白胨水、靛基质试剂:见附录 A中A.8。尿素琼脂(pH 7.2):见附录 A中A.9。氰化钾(KCN)培养基:见附录 A中A.10。赖氨酸脱羧酶试验培养基:见附录 A中A.11。糖发酵管:见附录 A中A.12。3.93.103.113.123.133.143.153.163.173.18邻硝基酚 β-D半乳糖苷(ONPG)培养基:见附录A中A.13。半固体琼脂:见附录 A中A.14。丙二酸钠培养基:见附录 A中A.15。沙门氏菌 O和H诊断血清。生化鉴定试剂盒。2 GB4789.4—20104检验程序沙门氏菌检验程序见图 1。检样25 g(mL)样品+225 mLBPW36 ℃±1 ℃,8 h~18 h1 mL+TTB 10 mL1 mL+SC 10 mL42 ℃±1 ℃,18 h~24 h36 ℃±1 ℃,18 h~24 hBSXLD(或 HE、显色培养基)36 ℃±1 ℃,18 h~24 h36 ℃±1 ℃,40 h~48 h挑取可疑菌落TSI,赖氨酸,NA, 靛基质, 尿素(pH 7.2),KCN生化鉴定试剂盒或全自动微生物生化鉴定系统+H2S+靛基质 -尿素-KCN-赖氨酸 +H2S+靛基质 +尿素- KCN-赖氨酸+H2S-靛基质-尿素-KCN-反应结果与左侧描述不符赖氨酸+/-甘露醇+、山梨醇+ONPG-沙门氏菌,血清学试验非沙门氏菌报告图1 沙门氏菌检验程序5操作步骤5.1前增菌称取 25 g(mL)样品放入盛有 225 mL BPW的无菌均质杯中,以8 000 r/min~10 000 r/min均质1 min~2 min,或置于盛有 225 mL BPW的无菌均质袋中,用拍击式均质器拍打1 min~2 min。若样品为液态,不需要均质,振荡混匀。如需测定 pH值,用1 mol/mL无菌NaOH或HCl调pH 至 6.8±0.2。3