ICS 65.100B 17DB32备案号：36403-2013江 苏省地方标准DB32/T2203-2012驱避剂中避蚊胺、驱蚊酯的测定液相色谱法、气相色谱法Analytical method of diethyltoluamide、ethyl butylacetylaminopropionate in repellentliquid chromatography、gas chromatography2012-12-28发布2013-02-28实施发布江苏省质量技术监督局 DB32/T 2203-2012前 言本标准按GB/T 1.1-2009《标准化工作导则第1部分：标准的结构和编写》编制。本标准由江苏省农产品质量检验测试中心提出并负责起草。本标准主要起草人：唐慧敏、丁夏萍、杨淑娴、徐成辰、田子华、万晓红。I DB32/T 2203-2012驱避剂中避蚊胺、驱蚊酯的测定液相色谱法、气相色谱法① ②1范围本标准规定了驱避剂中避蚊胺、驱蚊酯含量的液相色谱及气相色谱测定方法。本标准适用于以避蚊胺或驱蚊酯为有效成分的驱避剂（包括驱蚊花露水、驱蚊乳、驱蚊液）中避蚊胺、驱蚊酯含量的测定。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T 6682-1992分析实验室用水规格和试验方法3避蚊胺、驱蚊酯的质量分数的测定反相高效液相色谱法3.13.1.1方法原理试样用乙腈溶解，以乙腈+水为流动相，使用ZORBAXSB-C18为填料的不锈钢柱和紫外检测器，对试样中的避蚊胺、驱蚊酯进行反相高效液相色谱分离和测定。3.1.2试剂和材料3.1.2.13.1.2.23.1.2.33.1.2.4乙腈：色谱纯。水：符合GB/T 6682中规定的一级水。避蚊胺标样：≥99.0％。驱蚊酯标样：≥99.0％。3.1.3仪器3.1.3.13.1.3.23.1.3.33.1.3.4液相色谱仪：紫外检测器。色谱柱：ZORBAXSB-C18柱 250mm×4.6mm（id）， 5μ m（或具有等同效果的C18键合固定相）。电子天平（精确至0.1mg）。超声波清洗器。3.1.4操作条件3.1.4.13.1.4.2流动相：乙腈+水=55+45（V/V），经滤膜过滤，并超生脱气。流速：1.0ml/min。①②避蚊胺ISO通用名称：diethyltoluamide化学名称： N,N-二乙基-间-甲苯甲酰胺驱蚊酯ISO通用名称： ethyl butylacetylaminopropionate化学名称： 3-（N-丁基-乙酰胺基）丙酸乙酯1 DB32/T 2203-20123.1.4.33.1.4.43.1.4.53.1.4.63.1.4.7柱温：室温（温差变化应不大于2℃）。检测波长：225nm。过滤器：滤膜孔径约0.45μ m。进样量：5μ L。保留时间：避蚊胺约7.2min，驱蚊酯约5.3min（见资料性附录图A1.1-A1.4）。上述操作参数是典型的，可根据不同仪器及色谱柱特点，对给定操作参数作适当的调整，以期获得最佳效果。3.1.5测定步骤3.1.5.1标样溶液的制备称取避蚊胺（驱蚊酯）标样50mg（精确至0.2mg），置于50mL容量瓶中，加入乙腈溶解并稀释至刻度，超声振荡5min，冷却至室温，过滤备用。3.1.5.2试样溶液的制备称取含约避蚊胺（驱蚊酯）50mg (精确至 0.2mg)的试样，置于 50mL容量瓶中，加入乙腈溶解并稀释至刻度，超声波振荡5分钟，冷却至室温，过滤备用。3.1.5.3测定在上述操作条件下，待仪器基线稳定后，连续注入数针标样溶液，直至相邻两针的相对响应值变化小于1.5％后，按照标样溶液、试样溶液、试样溶液、标样溶液的顺序进行测定。3.1.5.4计算试样中避蚊胺（驱蚊酯）的质量分数X1（％），按式(1)计算：X1 ??A2 ?m2 ?P………………………………………………………………………………………(1)1A m?11式中:A1—标样溶液中，避蚊胺（驱蚊酯）峰面积的平均值；A2—试样溶液中，避蚊胺（驱蚊酯）峰面积的平均值；m1—避蚊胺（驱蚊酯）标样的质量，g；m2—试样的质量，g；P1—标样的质量分数，％。3.1.6允许差两次平行测定结果之差，避蚊胺、驱蚊酯应均不大于0.3%，取其算术平均值作为测定结果。3.2气相色谱法3.2.1方法原理试样用丙酮溶解，以邻苯二甲酸二丙烯酯作内标物，使用HP-5为填料的小口径毛细管柱和氢火焰离子化检测器，对试样中的避蚊胺（驱蚊酯）进行气相色谱分离和测定，内标法定量。3.2.2试剂和原理3.2.2.13.2.2.23.2.2.33.2.2.43.2.2.53.2.2.6丙酮：分析纯。无水硫酸镁：分析纯。避蚊胺标样：≥99.0％。驱蚊酯标样：≥99.0％。内标物：邻苯二甲酸二丙烯酯，不含干扰分析的杂质。内标物溶液：邻苯二甲酸二丙烯酯5g，置于250mL容量瓶中，用丙酮溶解并稀释至刻度，摇2 DB32/T 2203-2012匀。3.2.3仪器3.2.3.13.2.3.23.2.3.3气相色谱仪：具有氢火焰离子化检测器(FID)。色谱柱：HP-5毛细管柱30mm×0.32mm（id）×0.25μm。电子天平。3.2.4操作条件3.2.4.13.2.4.23.2.4.33.2.4.43.2.4.5温度（℃）：柱室170，气化室220，检测室220。气体流速(mL/min):载气（N2）1.0，氢气（H2）30.0，空气350。进样量：1.0μ L。分流比：50︰1。保留时间：避蚊胺（驱蚊酯）约 6.4min（6.5min），内标物约 10.3min（见附录 B图 B1.1～图B1.1）。上述操作参数是典型的，可根据不同仪器及色谱柱特点，对给定操作参数作适当的调整，以期获得最佳效果。3.2.5测定步骤3.2.5.1标样溶液的制备称取避蚊胺（驱蚊酯）标样约50mg（精确至0.2mg），置于25mL三角瓶中，加入5mL丙酮，准确加入2mL内标溶液，摇匀。3.2.5.2试样溶液的制备称取约含50mg避蚊胺（驱蚊酯）(精确至0.2mg)