ICS265.150 B50 D B 32 备案号： 江 苏省地方标准 DB32/T1736—2011 水生动物车轮虫病诊断方法 DiagnosemethodonAquaticanimaldiseaseofTrichodinaspp. 2011-04-15发布 2011-06-15实施 发布 江苏省质量技术监督局  DB32/T1736--2011 前 言 车轮虫病诊断是水生动物生物学诊断的重要部分，目前还没有该寄生虫病的诊断方法，特制定本 地方标准。 本标准按GB/T1.1–2009《标准化工作导则第1部分：标准的结构和编写规则》编制。 本标准由江苏省海洋与渔业局提出。 本标准起草单位：江苏省水生动物疫病预防控制中心。 本标准主要起草人：陈辉、黄春贵、邹勇、段翠兰、王习达、郭闯、方苹、陈静、刘训猛、郭立 新。 I  DB32/T1736-2011 水生动物车轮虫病诊断方法 1范围 本标准规定了水生动物车轮虫病诊断方法的仪器、程序和操作步骤。 本标准适用于水生动物车轮虫病的诊断。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T18088—2000出入境动物检疫采样 3仪器 3.1显微镜。 3.2解剖镜。 3.3解剖盘。 3.4弯头镊子。 3.5载玻片。 3.6盖玻片。 4诊断程序 车轮虫病诊断程序见图1。 车轮虫隶属于原生动物门、缘毛亚纲、缘毛目、壶形科、车轮虫属。车轮虫侧面观如毡帽状，反 面观为圆碟形，运动时如车轮转动样。隆起的一面为前面或称口面，相对而凹入的一面为反口 面。口面上有向左或反时针发方向螺旋状环绕的口沟，其末端通向胞口。口沟两侧 各着生一列 纤毛，形成口带，直达前庭腔。反口面的中间为齿环和辐线环。在辐线环上方有一马蹄形的大 核，一个长形的小核和一个伸缩泡，其中部向 体内凹入，形成附着盘，用于吸附在宿主身上。 车轮虫用附着盘附着在鱼体的鳃丝或皮肤上，并来回滑动。游泳时一般用反口面向前像车轮一 样转动，所以称为车轮虫。生殖用纵二分裂法和接合生殖。 常见能致病的车轮虫有10多种，寄生于各种淡水鱼、海水鱼的体表、鳃等处，主要危害鱼苗、鱼 种，严重时可引起大批死亡。大量寄生时，由于虫体的刺激，引起组织发炎，分泌大量粘液，在体部、 鳃上形成一层粘液层，虫体密集处，如鳍、头部、体表出现一层白翳。病鱼消瘦、发黑、游动缓慢，呼 吸困难，以致死亡。 1  DB32/T1736-2011 表观病鱼 解剖 鳃 皮肤 制片 膀胱、输尿管等 镜检 10×10 确诊为车轮虫 确诊为非车 轮虫 优势种 非优势种 出 报 告 图1车轮虫诊断程序 5操作步骤 5.1样品的收集和处理 2  DB32/T1736-2011 对有症状的水生动物，挑选3-5尾，至少不低于2尾的濒死个体；对无症状的水生动物，按GB/T18088 —2000的规定，随机取一定数量的个体。对样品先进行目检，确定病变部位，然后取鳃、皮肤、前鼻 孔内侧、膀胱、输尿管等病变组织或粘液制片。 5.2制片 用剪刀或解剖刀、镊子取病症的部位，同一部位分别制成两个玻片，标上组织名称。 5.3确诊优势种 将制好的玻片分别于显微镜低倍镜（10×10）下观察，见构成齿环的齿体具发达的空锥形锥部以及 向外的齿钩，则确定为车轮虫（具体见图2）。只要有一片中有单种寄生虫出现80％以上，可定为寄生 虫优势种。 5.4确诊车轮虫病 在低倍镜的视野下，车轮虫为优势种的可确定为车轮虫病。 5.5结果确认 上述结果如果为车轮虫病，不复查，报告为车轮虫病。若不是车轮虫病再复查，结果仍然如此，则 报告为非车轮虫病。 3