I 唾液 砷 作 为砷 暴 露 标志 物 的 可 行性 研 究 中文 摘要 【目 的 】 唾 液作 为 一种 检 测 载 体目 前 已 广泛 应 用 到 各种 临 床 疾病 及 环 境有 害 因 子的 检测 当 中， 然 而 唾液 中 砷 的 检测 刚 刚 起步 ， 其 能 否作 为 砷 暴 露检 测 载 体 目前 尚 存 在争 议。 本 课题 根 据 暴露 标 志 物 筛选 原 则 ，通 过 动物 实验 及 人 群 试验 两 方 面 联合 探 讨 唾液 砷 作 为砷 暴 露 标志 物 的 可行 性 ， 为实 现 砷 暴 露无 创 检 测提 供 理 论依 据 。 【 方 法 】 1 . 砷 在 唾 液 中 代 谢 及 排 泄 模 式 实 验 ，( 1 ) SD 大 鼠 部 分 ， 健 康 清 洁 级 雄 性 SD 大 鼠 21 只 。 一 次 性 灌 服 亚 砷 酸 钠 20 mg / k g 后 ， 于 0, 1- 2, 4- 5 , 7- 8, 11 - 12 , 17 - 18 , 23 - 24 小时 7 个时 间段 (每 时 间段 3 只大 鼠 ) 采 集血 液及 唾 液进 行砷 含 量检 测 。(2 ) 健 康志 愿者 部 分， 在 知 情同 意 的 基 础上 募 集 健康 志 愿者 4 名， 男 女 各半 ， 试 验 前后 禁 食 海产 品 各一 周， 于 8: 0 0 一次 性摄 入 海苔 20 g ，在 摄 入海 苔 前 (即 0h ) 和摄 入后 1 , 3, 6, 9, 1 2, 1 5, 1 8, 2 4, 3 6, 4 8, 6 0 和 7 2h ， 分 别 收 集 尿 液 和 唾 液 进 行 砷 含 量 检 测 。 2. 不 同 剂 量亚 砷酸 钠 染毒 大 鼠 后唾 液 砷 含 量及 其 与 血砷 、 尿 砷 含量 间 关 系 研究 ， 健 康 清洁 级 雄 性 SD 大 鼠 32 只 ， 适 应 性 饲 养 一 周 后 随 机 分 为 对 照 组 ( 等 量 生 理 盐 水 ) ， 亚 砷 酸 钠 低 (0 . 2m g / kg )、 中 ( 2. 0 mg / kg ) 、高 ( 2 0. 0 m g / k g) 四 组 ，每 组 8 只。 染毒 方 式采 用 经口 灌 胃 法 ， 隔 天 一 次 ， 连 续 两 周 后 收 集 血 液 、 尿 液 、 唾 液 及 组 织 进 行 检 测 。 3 . 慢 性 砷 中 毒 病 区 人 群 研 究 ， 在 山 西 省 山 阴 县地 方 性 砷 中 毒 ( 地 砷 病 ) 区 抽 取 4 个 病 村 的 70 名 常住 居 民作 为调 查 对象 ，地砷 病 皮肤 病 变按 《 地方 性 砷中 毒 诊断 标准 》( WS / T2 11 - 20 01 ) 进 行 诊 断 。 入 户 采 集 所 有 调 查 对 象 唾 液 、 尿 液 及 生 活 饮 用 水 进 行 砷 含 量 检 测 。 4. 砷 含 量 检 测 ， 水 砷 、 血 砷 含 量 采 用 原 子 荧 光 分 光 光 度 计 (A F S - 23 0 ) 进 行 检 测 ； 尿 砷 、 唾 液 砷 含 量 采 用 电 感 耦 合- 等 离 子 体 质 谱 ( I CP - M S) 进 行 检 测 ， 其 中 尿 砷 含 量 用 肌 酐 (C r ) 校正 。 【结 果 】 1． 砷 在 唾 液中 的 代 谢 及排 泄 模 式 实验 ，( 1 ) SD 大 鼠部 分 ， 大 鼠摄 入 亚 砷 酸钠 后 ， 其血 液中 砷 含量 急 剧 上 升， 在 1- 2 小时 时 间段 便 达到 峰值 ， 随 后 下降 ， 但 在 第 7- 8 小中文 摘要 唾 液砷 作 为砷 暴露 标 志物 的 可行 性 研 究 II 时时 间段 又 出现 第 二 个峰 值 ， 说 明砷 在 血 液中 的 代谢 存在 肝 肠 循 环。 唾 液 中 砷含 量 上 升 趋 势较 血 砷缓 慢 ， 在 第 7- 8 小 时时 间 段 达到 峰 值， 随后 逐 渐下 降。 ( 2) 健 康志 愿 者 部分 ，健康 志愿 者 在 摄 入海 苔 后 ， 尿总 砷 含 量逐 渐 上 升 ，其中 女 性 上升 趋 势 更 为明 显 ， 在第 18 小 时达 到 高 峰， 男 性在 第 24 小时 达到 高 峰 ， 随 后 逐渐 下 降。 唾 液 总 砷含 量 变 化同 尿 砷 变化 相 似 ， 但 达 到高 峰 时间 较 尿 砷提 前 ，女 性在 第 6 小 时达 到 高 峰 ，男 性 在 第 9 小 时达 到高 峰 。 2． 不同 剂 量亚 砷 酸 钠染 毒 大鼠 后唾 液 砷 含 量及 其 与 血 砷、 尿 砷 含量 间关 系 研究 ， 亚 砷酸 钠 染 毒 组大 鼠 体 重增 长 均低 于对 照 组， 其 中 高 剂 量 组与 对 照 组相 比 有明 显统 计 学差 异 (p < 0 .0 5 ) 。高 剂量 组 大鼠 肝脏 及 肾脏 脏器 系 数较 对照 组 有 明 显统 计 学差 异 ( p < 0 .0 5 )， 病理 切 片显 示高 剂 量组 大 鼠肝 、 肾 组 织均 有 不同 程度 损 伤 。 低、 中 、 高 染毒 组 大 鼠唾 液 、 血 液及 尿 液 中总 砷 含量 均明 显 高 于 对照 组 ， 且 各染 毒 组 随染 毒剂 量 的增 加 三 者 总砷 含 量也 明显 升 高 ， 具 有 显 著性 差异 ( p< 0. 0 5) 。大 鼠 唾 液 砷 含 量 与 血 砷 、 尿 砷 含 量 之 间 有 明 显 的 正 相 关 关 系 ， 相 关 系 数 分 别 为 0 .9 3 4 和 0. 9 6 0 (p < 0. 01 ) 。3 . 慢性 砷中 毒 病区 人群 研 究， 在 收集 的 水样 中 ，砷 含量 仍 较高 ，中 位 数 为 12 7 .2 2 ug / L ， 超 标 率 达 66 .7 % ， 7 0 名 居 民 中 有 37 人 有 皮 肤 症 状 。 不 同 水 砷 暴 露 组 间 唾液 砷 与尿 砷含 量 存在 明显 统 计学 差异 ( p< 0. 0 5) 。水砷 与唾 液 砷及 尿 砷之 间均 存 在 明 显的 正 相关 ， 相 关 系 数分 别为 0 .6 7 4 和 0 .6 8 6 (p < 0. 05 ) 。唾 液 砷与 尿 砷之 间 也存 在 高 度 相 关 ， 相 关 系 数 为 0. 7 94 (p < 0. 0 5) 。 另 外 ， 水 砷 、 尿 砷 及 唾 液 砷 与 皮 肤 症 状 均 密 切 相 关， 有 症 状组 与 无 症状 组 间 三 者含 量 均 有明 显 统 计 学差 异 (p < 0. 01 ) 。 【结 论 】 1． 动 物 实 验 和 健 康 志 愿 者 试 验 均 表 明 ，机 体 暴 露 砷 ( 无 机 砷 或 有 机 砷 ) 后 ， 唾 液中 砷的 代 谢及 排 泄 模式 与 血 砷 、尿 砷 模 式相 似 ，其 代谢 及 排 泄 半衰 期 介 于 血砷 和 尿 砷之 间 。 2． S D 大鼠 经 不同 剂量 亚 砷 酸钠 染 毒 后， 随染 毒 剂量 的 增 加 ，唾液 砷 含 量明 显 升 高， 且 机 体小 剂 量暴 露 砷 化合 物 ，其 唾 液 中砷 含 量 便有 升 高 趋势 。 3． 慢 性 砷中 毒 病 区 人 群唾 液 中砷 含 量 与水 砷 、 尿 砷含 量 存 在高 度 正 相 关性 ， 并 且与 砷 中毒 皮 肤 症状 密 切 相关 。 4． 本 课 题 通 过 SD 大 鼠 、 健 康 志 愿 者 和 慢 性 砷 中 毒 病 区 人 群 实 验 研 究 均 表 明 ， 唾液 砷能 够 很好 地 反 映机 体 的 砷 暴露 程 度 ，其 作 为砷 暴露 标 志 物 不仅 在 理 论 上可 行 ， 而且 在慢 性 砷中 毒 病 区人 群 中 具 有较 好 的 实际 应 用 性 。此 外 ， 唾液 具 有 采 样无 创 、 简唾液 砷 作为 砷暴 露 标志 物的 可 行性 研 究 中文 摘要 II I 易、 快 速 且 易接 受 等 一系 列 优 点 ，其 与 砷 暴露 现 有的 检测 载 体 尿 液、 毛 发 和 指甲 等 联 合应 用 ， 能够 有 效 地弥 补 各 自的 不 足 ，更 好 地 进 行砷 暴 露 高危 人 群 的筛 查 。 关键 词， 砷 ；唾 液 ；生 物 学标 志； 亚 砷 酸钠 ； 大 鼠 ；志 愿 者 ；血 液 ；尿 液 ；慢 性 砷中 毒 作 者， 王大 朋 指导 老 师， 安 艳Ab st r a ct T he Fe a si bi li t y St ud y of Sa l i v ar y Ar s e ni c a s a Ne w Bi o ma rk e r of Ar s e ni c E xp os u r e IV Th e Fe a s ib il i t y S tu d y of S a li v ar y A rs en ic as a N ew Bi o ma r k er o f A rs en ic Ex p os u re A bs t r a c t O bj e ct iv e : Sa l iv a a s a bi ol og ic a l s a mp l e ha s a s i mp l e , no n - i nv a s i ve c ol le c t in g me t h od , a n d i s e a s y t o s t or e , s a l iv a ry a na l ys i s ha s b e c om e a us e fu l t oo l fo r di s e as e di a gn os is a nd bi o l og i c a l mo n i t o r in g . Ho we ve r, t he de t e rm i n a t io n of a r s en i c c on c e n tr a ti on i n s a l iv a i s j us t un f o l di ng , wh e t he r s a l iv a r y a r s en i c c a n b e us e d a s a n e w bi om a r k e r of a r s en i c e xp os ur e or no t i s s t il l c o nt ro v e r s ia l . Th e pr e s en t s tu dy a i ms t o fu r t he r ve r if y t he fe a s i bi li ty of s a l iv a r y a r s en i c a s a n e w bi o ma r ke r of a r s en i c e xp o s ur e a c co r di ng t o t he s c r ee ni ng pr i nc i pl e o f bi om a r ke r. M e th o d s : 1 . Th e s t ud y of t h e r e g ul a r p a t te r n of a r s en i c me t a bo l is m a nd e x c r et i on i n s a l iv a : ( 1 ) SD r a ts e x pe ri me n t s : A s i n gl e or a l ga v a ge d os e of s od i um a r s en i t e ( 20 m g / kg ) wa s a d mi ni s tr a te d t o 21 a du l t ma l e Sp r a gu e -D a wl e y r at s . Th e n c ol le c t ed bl oo d a nd s a l iv a s a mp l e s a t 0 , 1- 2, 4- 5, 7- 8, 11 - 12 , 17 - 18 , 23 - 24 h fo r t o ta l a r se ni c de t ec t io n . ( 2) Th e s t ud y of he a lt hy vo l un t ee r s : Fo u r vo l un t e e rs ha ve r ef r a i ne d fr om e a t in g a ny s e a fo o d fo r on e we e k be fo r e a nd a ft e r t he y c on s u me d 2 0g s e a we e d a t 8: 00 a m. , a nd t he n c ol le c t ed u r in e a n d s a l iv a s a mp l e s a t t he t i me be fo r e i n ge s ti ng s e a we e d ( 0h ) a nd 1, 3, 6, 9, 12 , 15 , 1 8, 24 , 36 , 48 , 60 a n d 72 h a ft e r i nt ak e fo r t ot al a rs e n i c de te c ti o n. 2. Th e s t u dy o f s a l iv a r y a r s en i c a nd i ts r e la t io n s hi p wi t h b l oo d a r se n i c a nd ur i na r y a r s en i c of SD r a ts a ft e r e xp o s ur e t o di ff e r e nt l e ve ls of s od i um a r s en i t e: Th i r ty t wo a du l t ma l e Sp r a gu e -D a wl e y r a ts we r e r a nd o ml y d i vi d e d i nt o fo u r gr ou ps , t h e r at s of c on t ro l gr ou p we r e gi v e n or a l ga v a ge of 0. 9 % Na Cl , a nd o t he r t hr e e gr ou p s we r e gi v e n or a l ga v a ge do s e s o f 0. 2 , 2. 0 , 20 . 0 mg / kg bo