中华人民共和国国家标准GB5009.169—2016食品安全国家标准食品中牛磺酸的测定2016-08-31发布2016-09-20实施中华人民共和国发布国家卫生和计划生育委员会GB5009.169—2016前言GBT5009.169—2003《食品中牛磺酸的测定 》和GB5413.26—2010《食品安全国家标本标准代替 /准婴幼儿食品和乳品中牛磺酸的测定》GBT5009.169—2003相比,主要变化如下 :本标准与 /———标准名称修改为 “食品安全国家标准 食品中牛磺酸的测定 ”;———增加了OPA柱后衍生高效液相色谱法为第一法;增加了丹磺酰氯柱前衍生高效液相色谱法为第二法;———删除了薄层色谱法 ⅠGB5009.169—2016食品安全国家标准食品中牛磺酸的测定范围1本标准规定了食品中牛磺酸测定的方法本标准适用于婴幼儿配方食品 乳粉豆粉豆浆含乳饮料特殊用途饮料风味饮料固体饮料果冻中牛磺酸的测定 第一法邻苯二甲醛(OPA)柱后衍生高效液相色谱法原理2试样用水溶解 ,用偏磷酸沉淀蛋白 ,经超声波震荡提取 离心微孔膜过滤后,通过钠离子色谱柱分离,与邻苯二甲醛(OPA)衍生反应,用荧光检测器进行检测,外标法定量试剂和材料3除非另有说明 ,本方法所用试剂均为分析纯 ,水为GBT6682/ 规定的一级水试剂3.1偏磷酸3.1.13.1.23.1.33.1.43.1.53.1.63.1.73.1.8柠檬酸三钠苯酚硝酸甲醇:色谱纯硼酸氢氧化钾邻苯二甲醛(OPA)3.1.9 2-巯基乙醇聚氧乙烯月桂酸醚 (Brij-35)3.1.103.1.113.1.12亚铁氰化钾乙酸锌3.1.13淀粉酶:活力≥1.5U/mg试剂配制3.2偏磷酸溶液(30g/L)3.2.1称取30.0g偏磷酸(3.1.1),用水溶解并定容至 1000mL1GB5009.169—2016柠檬酸三钠溶液3.2.2称取19.6g柠檬酸三钠(3.1.2),加950mL水溶解,加入1mL苯酚(3.1.3),用硝酸(3.1.4)调pH至3.10~3.25,经0.45μm微孔滤膜过滤 柱后荧光衍生溶液 (邻苯二甲醛溶液 )3.2.33.2.3.1硼酸钾溶液(0.5molL/):称取30.9g硼酸(3.1.6),26.3g氢氧化钾(3.1.7),用水溶解并定容至1000mL3.2.3.2邻苯二甲醛衍生溶液:称取0.60g邻苯二甲醛(3.1.8),用10mL甲醇(3.1.5)溶解后,加入巯基乙醇( )和/硼酸钾溶液(3.2.3.1) 定容至( ),用3.1.90.35gBrij-353.1.100.5molL0.5mL2-1000mL,经0.45μm微孔滤膜过滤 临用前现配沉淀剂3.2.43.2.4.1沉淀剂Ⅰ:称取15.0g亚铁氰化钾(3.1.11),用水溶解并定容至 100mL该沉淀剂在室温下个月内稳定3.2.4.2沉淀剂Ⅱ:称取30.0g乙酸锌(3.1.12),用水溶解并定容至 100mL该沉淀剂在室温下 3个月内保持稳定3标准品3.3纯度≥99%,CAS107-35-7:标准溶液配制3.4/)3.4.1牛磺酸标准储备溶液(1mg mL准确称取0.1000g牛磺酸标准品(3.3),用水溶解并定容至100mL牛磺酸标准工作液3.4.2将牛磺酸标准储备溶液(3.4.1)用水稀释制备一系列标准溶液,标准系列浓度为: /0 gmLμ/ // / /,临用前现配5.0μgmL10.0gmL15.0gmL20.0gmL25.0gmLμμμμ仪器和设备4高效液相色谱仪 :带有荧光检测器 柱后反应器4.14.24.34.4荧光衍生溶剂输液泵 超声波震荡器 4.5 pH计:精度0.01离心机:不低于5000rmin/4.64.7微孔滤膜:0.45μm4.8天平:感量0.0001g2GB5009.169—2016分析步骤试样制备55.1准确称取固体试样 1g~5g(精确至0.01g)于锥形瓶中,加入40℃左右温水20mL,摇匀使试样溶解,放入超声波振荡器中超声提取 10mi