ICS 65.120B 46DB43湖 南 省地方标准DB4 3/T 1202—2016饲料中氟苯尼考的测定高效液相色谱法De te rmination of Florfe nicolin fe edsHighperformanceliquidchroma togra phicme thod2016- 12- 13 发布2017- 02- 13实施湖南省质量技术监督局发布DB43/T 1202—2016目次前言……………………………………………………………………………………………………… Ⅱ1范围…………………………………………………………………………………………………… 12规范性引用文件……………………………………………………………………………………… 13原理…………………………………………………………………………………………………… 14试剂与材料…………………………………………………………………………………………… 15仪器与设备…………………………………………………………………………………………… 16采样与试样的制备…………………………………………………………………………………… 27测定步骤……………………………………………………………………………………………… 28结果计算……………………………………………………………………………………………… 29灵敏度准确度和精密度……………………………………………………………………… 3附录 A（资料性附录）氟苯尼考高效液相色谱图……………………………………………………4IDB43/T 1202—2016前 言本标准按GB/T 1.1—2009给出的规则起草请注意本标准某些内容可能涉及专利本标准发布机构不承担识别这些专利的责任本标准由湖南省畜牧水产局提出并归口本标准起草单位：湖南省兽药饲料监察所湖南省冷水江市农业局本标准主要起草人：匡光伟欧阳龙隆雪明邓昉陈爱忠张俊波周玉洁李裕易建希江燕邓均红IIDB43/T 1202—2016饲料中氟苯尼考的测定高效液相色谱法1范围本标准规定了饲料中氟苯尼考（Florfenicol）的高效液相色谱测定方法本标准适用于我省配合饲料浓缩饲料添加剂预混合饲料中氟苯尼考的测定2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的凡是注日期的引用文件仅注日期的版本适用于本文件凡是不注日期的引用文件其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件GB/T 6682分析实验室用水规格和试验方法GB/T 14699.1饲 料采样GB/T 20195动物饲 料试样的制备3原理采用 30%甲醇溶液提取试样中的氟苯尼考固相萃取柱净化乙腈溶液洗脱高效液相色谱-紫外法测定外标法定量4试剂与材料除另有说明外所用试剂均为分析纯实验用水应符合GB/T6682一级水的规定4.1甲醇色谱纯4.2乙腈色谱纯4.330%甲醇溶液：将30mL甲醇与70mL水混合均匀4.440%乙腈溶液：将40mL乙腈与60mL水混合均匀4.5氟苯尼考标准品纯度≥99.7%4.6标准储备液：称取氟苯尼考标准品25mg（精确到0.01mg）于25mL的容量瓶中用乙腈溶解并定容至刻度即为1.00mg/mL的氟苯尼考标准储备液-18℃以下避光保存可保存1年4.7标准工作液：移取适量氟苯尼考标准储备液用 40%乙腈溶液稀释成浓度为(1.00~100)μg/mL的氟苯尼考标准工作液现配现用4.8微孔滤膜：0.22μm有机膜4.9Oasis HLB固相萃取柱：60mg3mL或相当者5仪器与设备5.1高效液相色谱仪：配有紫外或二极管阵列检测器5.2分析天平：感量 0.00001g和 0.001g1DB43/T 1202—20165.3离心机：转速≥10 000r/min带有50mL离心管5.4超声波清洗机6采样与试样的制备6.1采样按GB/T 14699.1的规定执行6.2试样制备按GB/T 20195的规定执行7测定步骤7.1提取称取试样2g（精确到0.001g）置于50mL离心管中准确加入20mL30%甲醇溶液涡旋振摇1min超声提取5min涡旋30s后静