文本描述
中 华 人 民 共 和 国 出 入 境 检 验 检 疫 行 业 标 准犛犖／犜２４７３ —２０１０芦 笋 枯 萎 病 菌 检 疫 鉴 定 方 法犐犱犲狀狋犻犳犻犮犪狋犻狅狀 狅犳 犉狌狊犪狉犻狌犿 狅狓狔狊狆狅狉狌犿犳．狊狆．犪狊狆犪狉犪犵犻２０１００１１０ 发 布２０１００７１６ 实 施中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局发布 犛犖／犜２４７３ —２０１０前 言 本 标 准 的 附 录 Ａ 、附 录Ｂ 和 附 录 Ｃ 均 为 资 料 性 附 录。本 标 准 由 国 家 认 证 认 可 监 督 管 理 委 员 会 提 出并 归 口。本 标 准 主 要 起 草 单 位 ：中 华 人 民 共 和 国 深圳 出 入 境 检 验 检 疫 局 、深 圳 市 检 验 检 疫 科 学 研 究 院。本 标 准 主 要 起 草 人 ：程 颖 慧 、章 桂 明 、王颖 、龙 海 、徐 浪 、郑 耘 、杨 伟 东 、陈 枝 楠 、谭 彦 彩。本 标 准 系 首 次 发 布 的 出 入 境 检 验 检 疫 行 业 标准。Ⅰ 犛犖／犜２４７３ —２０１０芦 笋 枯 萎 病 菌 检 疫 鉴 定 方 法１ 范 围本 标 准 规 定 了 芦 笋 （犃狊狆犪狉犪犵狌狊狅犳犳犻犮犻狀犪犾犻狊 Ｌｉｎｎ）种子 及 新 鲜 芦 笋 组 织 上 的 芦 笋 枯 萎 病 菌 （ 犉狌狊犪狉犻狌犿 狅狓狔狊狆狅狉狌 犿 犛犮犺犾犲犮犺狋 ．ｆ．ｓｐ．犪狊狆犪狉犪犵犻 Ｃｏｈｅｎ＆ Ｈｅａｌｄ）的检 疫 和 鉴 定 方 法。本 标 准 适 用 于 对 来 自 芦 笋 枯 萎 病 疫 区 的 芦 笋种 子 和 新 鲜 芦 笋 组 织 的 检 疫。２ 规 范 性 引 用 文 件下 列 文 件 中 的 条 款 通 过 本 标 准 的 引 用 而 成 为本 标 准 的 条 款 。 凡 是 注 日 期 的 引 用文 件 ，其 随 后 所 有的 修 改 单 （不 包 括 勘 误 的 内 容 ）或 修 订版 均 不 适 用 于 本 标 准 ，然 而 ，鼓 励 根 据 本 标 准 达 成 协 议 的 各 方 研 究是 否 可 使 用 这 些 文 件 的 最 新 版 本 。 凡 是 不 注 日 期的 引 用 文 件 ，其 最 新 版 本 适 用 于 本 标 准。ＳＮ／Ｔ１８０９ 进 出 境 植 物 种 子 检 疫 规 程ＳＮ／Ｔ２１２２ 进 出 境 植 物 及 植 物 产 品 检 疫 抽 样３ 原 理３．１ 分 类 学 地 位英 文 名 ：ＦｕｓａｒｉｕｍＷｉｌｔｏｆＡｓｐａｒａｇｕｓ学 名 ：犉狌狊犪狉犻狌犿狅狓狔狊狆狅狉狌犿Ｓｃｈｌｅｃｈｔ．ｆ．ｓｐ．犪狊狆犪狉犪犵犻 Ｃｏｈｅｎａｎｄ Ｈｅａｌｄ １９４１芦 笋 枯 萎 病 菌 属 真 菌 界 （Ｆｕｎｇｉ），有丝分 裂 孢 子 真 菌 ［１］（Ｍｉｔｏｓｐｏｒｉｃｆｕｎｇｉ）、丝孢 菌 纲 （Ｈｙｐｈｏｍｙｃｅｔｅｓ），丛梗 孢 目 （Ｍｏｎｉｌａｌｅｓ），瘤座 孢 科 （Ｔｕｂｅｒｃｕｌａｒｉａｃｅａｅ），镰刀 菌 属 （犉狌狊犪狉犻狌犿 ）。３．２ 鉴 定 原 理该 真 菌 可 以 通 过 种 子 传 播 ，其 为 害 症 状 、形态 特 征 、培 养 性 状 、寄 主 范 围 等 特 征 是 其 鉴 定 的 依 据 。依照 这 些 特 征 能 将 该 菌 与 其 他 真 菌 尤 其 是 与 芦笋 上 的 其 他 致 病 镰 刀 菌 区 别 开 来。４ 仪 器 和 用 具４．１ 仪 器体 视 显 微 镜 、光 学 显 微 镜 （带 显 微 照 相装 置 ）、测 微 尺 、天 平 （感 量 ０．１ ｇ）、超净 工 作 台 、光 照 培 养 箱 或光 照 培 养 架 等。４．２ 用 具紫 外 灯 管 、手 持 放 大 镜 、滤纸 、烧 杯 、培 养 皿 、三角 瓶 、镊 子 、剪 刀 、载 玻 片 、盖玻 片 、量 筒 、酒 精 灯 、吸管 等。５ 试 剂 和 培 养 基５．１ 试 剂琼 脂 粉 、蔗 糖 、无 菌 水 、１．２５％次氯 酸 钠 （ＮａＣｌＯ ）、７５ ％ 酒 精 、蛋白 胨 、磷 酸 二 氢 钾 （Ｋ Ｈ ２ＰＯ４）、硫酸镁 （ＭｇＳＯ ４·７Ｈ ２Ｏ ）、硫酸 链 霉 素 、硫 酸 新 霉 素 、腈 菌 唑 等。５．２ 培 养 基马 铃 薯 蔗 糖 培 养 基 （ＰＳＡ）、腈 菌 唑 培 养 基 （Ｍ ＢＡ ）和 马 铃 薯 葡 萄 糖 培 养 基 （ＰＤＡ ）。６ 现 场 抽 样按 照 ＳＮ／Ｔ１８０９ 及ＳＮ／Ｔ ２１２２规 定 进 行 取 样。１ 犛犖／犜２４７３ —２０１０７ 实 验 室 检 验７．１ 症 状 检 查受 侵 染 的 植 株 的 症 状 参 见 附 录Ａ 第 Ａ ．３ 章。７．２ 保 湿 培 养７．２．１ 种 子 保 湿 培 养将 检 验 样 品 用 有 效 成 分 为 １．２５％的 次 氯酸 钠 （ＮａＣｌＯ ）溶 液 表 面 灭 菌 ３ ｍｉｎ ～４ｍｉｎ 后 ，用 灭 菌 水 洗涤 两 次 ，放 在 垫 有 ３ 层 已 灭 菌 湿 滤 纸 的 培养 皿 中 ，每 皿 １０ 粒 ，在 ２０ ℃ ～２２℃ 下 放 置 ２４ ｈ 后 ，－２０℃冷冻 ２４ ｈ，转至 ２５ ℃ 培 养 箱 或 培 养 架 上 培 养 ，黑 暗 和 紫 外 光 照各 １２ ｈ 交 替 ，１４ ｄ 后 观 察 种 子 上 是 否 出 现白 色 菌 丝 或 霉 状 物 。 药 剂 处 理 过 的 种 子 需 先 洗 去表 面 的 种 衣 剂 ，再 按 照 上 述 方 法 保 湿 培 养。７．２．２ 新 鲜 植 物 组 织 保 湿 培 养取 待 检 样 品 的 茎 切 成 １ ｃｍ 长的 小 段 ，冲 洗 掉 表 面 的 泥 土 杂 物 后 ，在 ７５ ％ 的 酒 精 溶 液 中 浸 泡 １ ｍｉｎ ，经 灭 菌 水 洗
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