文本描述
中 华 人 民 共 和 国 出 入 境 检 验 检 疫 行 业 标 准犛犖/犜2464 —2010洋 葱 条 黑 粉 病 菌 检 疫 鉴 定 方 法犐犱犲狀狋犻犳犻犮犪狋犻狅狀 狅犳犝狉狅犮狔狊狋犻狊犮犲狆狌犾犪犲犉狉狅狊狋20100110 发 布20100716 实 施中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局发布 中 华 人 民 共 和 国 出 入境 检 验 检 疫行 业 标 准洋 葱 条 黑 粉 病 菌 检 疫 鉴 定 方 法SN/T2464 —2010中国 标准出 版社 出版北 京 复 兴 门 外 三 里 河北 街 16号邮 政 编 码 :100045网 址 www.spc电 话 :68523946 68517548中 国 标 准 出 版 社 秦 皇岛 印 刷 厂 印 刷开 本880 × 1230 1/16 印 张0.5 字 数千 字82010 年 4 月第 一 版 2010 年 4 月 第 一 次 印 刷印 数 1—1600书 号 :155066·220704 定 价14 .00元 犛犖/犜 2464 —2010前 言本 标 准 的 附 录 A和 附 录 B 均 为 资 料 性 附 录。本 标 准 由 国 家 认 证 认 可 监 督 管 理 委 员 会 提 出并 归 口。本 标 准 起 草 单 位 :中 华 人 民 共 和 国 天 津 出入 境 检 验 检 疫 局。本 标 准 主 要 起 草 人 :廖 芳 、罗 加 凤 、郭京 泽 、张 裕 君 、刘 跃 庭 、崔 铁 军 、王 金 成 、刘 鹏。本 标 准 系 首 次 发 布 的 出 入 境 检 验 检 疫 行 业 标准。Ⅰ 犛犖/犜 2464 —2010洋 葱 条 黑 粉 病 菌 检 疫 鉴 定 方 法1 范 围本 标 准 规 定 了 进 出 境 植 物 检 疫 中 洋 葱 条 黑 粉病 菌 (Urocystiscepulae)的 检 疫 鉴 定 方 法 。本 标 准 适 用 于 葱 属 寄 主 上 洋 葱 条 黑 粉 病 菌 的检 疫 鉴 定。2 规 范 性 引 用 文 件下 列 文 件 中 的 条 款 通 过 本 标 准 的 引 用 而 成 为本 标 准 的 条 款 。 凡 是 注 日 期 的 引 用文 件 ,其 随 后 所 有的 修 改 单 (不 包 括 勘 误 的 内 容 )或 修 订版 均 不 适 用 于 本 标 准 ,然 而 ,鼓 励 根 据 本 标 准 达 成 协 议 的 各 方 研 究是 否 可 使 用 这 些 文 件 的 最 新 版 本 。 凡 是 不 注 日 期的 引 用 文 件 ,其 最 新 版 本 适 用 于 本 标 准。GB/T18085 植 物 检 疫 小 麦 矮 化 腥 黑 穗 病 菌 检 疫 鉴 定 方 法3 原 理洋 葱 条 黑 粉 病 菌 (UrocystiscepulaeFrost)主要 为 害 葱 属 (Alliumspp .)植 物 ,不 危 害 葱 属 以外 的 植物 。 洋 葱 条 黑 粉 病 菌 寄 主 范 围 、孢 子 球 形 态 特征 、寄 主 植 物 的 症 状 (参 见 附 录A )、洋 葱 琼 脂 培 养 基 上 孢子 球 萌 发 特 性 是 鉴 定 该 病 菌 的 依 据。4 仪 器 和 用 具多 功 能 显 微 镜 (具 测 微 尺 )、体 视 显微 镜 、手 持 放 大 镜 、低 速 离 心 机 、往 复 式 振 荡 器 、涡 旋 振 荡 器、干 热灭 菌 器 、高 压 灭 菌 器 、普 通 天 平 (感量 1/100 g)、生 物 安 全 柜 或 超 净台 、生 物 培 养 箱 (具 光 照 )、可 调 微 量 加样 器 (5 μL ~200 μL )、三角 瓶 (250 mL )、离 心 管 、载 玻片 (长 × 宽 为 25 .3 m m × 76 .2 m m ,厚 0.8 m m)、盖 玻 片 (18 m m ×18 m m )、Parafilm 膜 或 铝 箔 纸 、Eppendorf管 (1.5mL )、培 养 皿 、接 种 针 、三 角 推。5 试 剂 和 培 养 基5.1 试 剂有 效 成 分 为 0.25%的 次氯 酸 钠 溶 液 、吐 温20 (Tween20)、席 尔氏 浮 载 剂 (见GB/T18085 —2000附 录 A 中席 尔 氏 浮 载 剂 配 制 方 法 )、封 片 剂 、无 荧 光 显 微 镜 物 镜 镜 头 油 (Nd=1.516)、琼脂 粉 、灭 菌 水 。5.2 培 养 基洋 葱 琼 脂 培 养 基 用 于 病 原 菌 培 养 性 状 的 观 察及 病 原 菌 的 保 存。洋 葱 琼 脂 培 养 基 的 制 备 :称 取 琼 脂 粉 15 g~20g,加入 900 mL水 和 100 mL新 鲜 的 健 康 洋 葱 汁 液,装 入 三 角 瓶 中 ,121℃ 高 压 灭 菌 30 min ,待 冷 却 至 40 ℃ 左 右 ,倒 入 培 养 皿 ,凝 固 后 ,用 三 角推 蘸 取 悬 浮 液均 匀 涂 布 在 培 养 基 表 面。6 实 验 室 检 验6.1 种 子 的 洗 涤 检 验6.1.1 样 品 制 备 及 离 心 与 定 容按 GB/T18085执 行。6.1.2 镜 检按 GB/T18085检 查 洋 葱 条 黑 粉 病 菌 孢 子 球 的 有 无 及 其 形 态大 小 ,经 检 查 含 有 可 疑 孢 子 球的 进 一步 作 萌 发 实 验。1 犛犖/犜 2464 —20106.2 鳞 茎 与 寄 主 残 体 的 检 验用 放 大 镜 或 肉 眼 仔 细 检 查 鳞 茎 或 寄 主 残 体 表面 是 否 存 在 银 灰 色 泡 状 囊