版权所有·禁止翻制、电子传阅、发售中 华 人 民 共 和 国 出 入 境 检 验 检 疫 行 业 标 准! "!"#!"#$ !""%牛 副 结 核 病 酶 联 免 疫 吸 附 试 验操 作 规 程$%&'&(&)&*+,-./+0)1,2+31//4,&5&%6+,'7557.*&%6&81,+97%7'46+%(4)&515!""%0&!0!'发 布!""(0"%0"&实 施中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局发布 提供免费下载版权所有·禁止翻制、电子传阅、发售!"!#!"#$"!""%前 !!言!!本 标 准 由 国 家 认 证 认可 监 督 管 理 委 员 会 提 出 并 归 口!本 标 准 起 草 单 位 "中 华 人 民 共 和 国 天 津 出 入 境检 验 检 疫 局!本 标 准 主 要 起 草 人 "霍 蕾 #王 玉 玲 #董 志 珍 #侯 艳 梅 !本 标 准 系 首 次 发 布 的 出 入 境 检 验 检 疫 行 业 标准!! 版权所有·禁止翻制、电子传阅、发售!"!#!"#$"!""%牛 副 结 核 病 酶 联 免 疫 吸 附 试 验 操 作 规 程&!范 围本 标 准 规 定 了 牛 副 结 核 病 酶 联 免 疫 吸 附 试 验检 测 方 法!本 标 准 适 用 于 牛 副 结 核 病 抗 体 的 检 测!!!规 范 性 引 用 文 件下 列 文 件 中 的 条 款 通 过 本 标 准 的 引 用 而 成 为本 标 准 的 条 款 !凡 是 注 日 期 的引 用 文 件 $其 随 后 所 有的 修 改 单 %不 包 括 勘 误 的 内 容 &或 修 订 版 均 不 适 用 于本 标 准 $然 而 $鼓 励 根 据 本 标 准 达 成 协 议 的 各 方 研 究是 否 可 使 用 这 些 文 件 的 最 新 版 本 !凡是 不 注 日 期 的 引 用 文 件 $其 最 新 版 本 适 用 于 本 标 准!!"'#$$%&!分 析 实 验 室 用 水 规 格 和 试 验 方 法 %'&!"#$$%& '((&)*+,-./$($($#!试 验 材 料#0&!试 剂(((副 结 核 分 支 杆 菌 抗 原 包 被 板)(((阳 性 对 照 血 清)(((阴 性 对 照 血 清)(((辣 根 过 氧 化 物 酶 %123.&标 记 的 二 抗 抗 体)(((样 品 稀 释 液)(((洗 板 液)(((#4"底 物 溶 液)(((终 止 液!试 剂 盒 应 于 &5"65保 存 !使用 前 需 将 其 恢 复 至 室 温 %&75"&85&$并 混 合 均 匀!#0!!待 检 血 清按 常 规 方 法 采 血 并 分 离 血 清 $置 95冰 箱中 备 用 $如 需 长 期 保 存 $应 置 于 :&75冰 箱 中!'!设 备 和 材 料'0&!适 用 于 ($孔 微 量 反 应 板 的酶 标 仪!'0!!振 荡 器!'0#!'77;<#877;<#'777;<量 筒!'0'!%道 或 '&道 洗 板 机!'0(!%道 或 '&道 移 液 器 %87 <"/77 <&!##'0$!单 道 移 液 器 %708 <"'7<97<"&77 <&77 <"'777 <) )&!######'0%!用 于 稀 释 样 本 的 ($孔 微 量反 应 板!'0)!冰 箱!(!操 作 程 序(0&!待 检 血 清 的 稀 释被 检 血 清 按 所 选 试 剂 盒 要 求 稀 释 $在 振 荡 器 上充 分 混 匀 后 $备 用!' 提供免费下载版权所有·禁止翻制、电子传阅、发售!"!#!"#$"!""%(0!!对 照 的 设 置将 阳 性 对 照 血 清 和 阴 性 对 照 血 清 按所 选 试 剂 盒 要 求 稀 释 后 $分别 加 至 包 被 板 的 相 应 孔中 $并 作 好记 录!(0#!加 样在 包 被 板 的 其 他 相 应 孔 中 按 所 选 试 剂 盒 要 求加 入 工 作 浓 度 的 被 检 样 品 $并 作 好 记 录!(0'!感 作将 包 被 板 在 振 荡 器 上 充 分 混 匀 后 $按 所 选 试 剂盒 要 求 的 温 度 和 时 间 进 行 感 作!(0(!洗 板(0(0&!洗 液 的 稀 释用 蒸 馏 水 将 浓 缩 洗 板 液 稀 释 成 工 作 浓 度 $混 匀备 用 !稀 释 用 蒸 馏 水 应 符 合的 要 求!!"#$$%&'(0(0!!洗 板弃 掉 包 被 板 各 孔 的 液 体 $每 孔 加 入 约 /77 <工作 浓 度 的 洗 板 液 $按 所 选 试 剂 盒要 求 的 次 数 清 洗 微#孔 !最 后 一 次 清 洗 后 $将 包 被 板 在 吸水 纸 上 轻 拍 $以 去 掉 孔 内 剩 余 的 液 体!(0$!加 酶 标 结 合 物按 所 选 试 剂 盒 要 求 $每 孔 加 入 工 作 浓 度 的 辣 根过 氧 化 物 酶 %123.&标 记 的 抗 体!(0%!感 作将 包 被 板 在 振 荡 器 上 混 合 均 匀 后 $按 所 选 试 剂盒 要 求 温 度 和 时 间 进 行 感 作!(0)!洗 板重 复 8080&的 操 作!(0*!加 底 物按 所 选 试 剂 盒 要 求 $每 孔 加 入#4"底 物 溶 液!加 入 底 物 后 $应 观 察 所 有 孔 内 的 颜 色 变 化 是 否正 常 !不 正 常 的 颜 色 变 化 包 括 "孔 内 出 现 点 状 或 片 状的 沉 淀 物 !如 果 出 现 这 种 情 况 $这 个孔 的 样 品 检 测 为 无 效!(0&"!感 作从 加 完 第 一 孔 开 始 计 时 $将包 被 板 置 于 符 合温 度 要 求 的 黑暗 处 $按 所 选 试 剂 盒要 求 的 时 间 进 行感 作!(0&&!加 终