文本描述
中 华 人 民 共 和 国 出 入 境 检 验 检 疫 行 业 标 准犛犖/犜2206 .7—2010化 妆 品 微 生 物 检 测 方 法第 7 部 分 :蛋 白 免 疫 印 迹 法 检 测疯 牛 病 病 原犇犲狋犲狉犿犻狀犪狋犻狅狀 狅犳 犿犻犮狉狅犫犻狅犾狅犵犻犮犪犾犻狀 犮狅狊犿犲狋犻犮狊—犘犪狉狋7:犇犲狋犲狉犿犻狀犪狋犻狅狀狅犳犫狅狏犻狀犲狊狆狅狀犵犻犳狅狉犿 犲狀犮犲狆犺犪犾狅狆犪狋犺狔 (犅犛犈)犫狔狑犲狊狋犲狉狀 犫犾狅狋 犿犲狋犺狅犱20100302 发 布20100916 实 施中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局发布 犛犖/犜2206 .7—2010前 言 SN/T2206 《化 妆 品 微 生 物 检 测 方 法 》系 列 标 准 共 分 为 7 部 分:——— 第 1 部 分 :沙 门 氏 菌;——— 第 2 部 分 :需 氧 芽 孢 杆 菌 和 蜡 样芽 孢 杆 菌;——— 第 3 部 分 :肺 炎 克 雷 伯 氏 菌;——— 第 4 部 分 :链 球 菌;——— 第 5 部 分 :肠 球 菌;——— 第 6 部 分 :破 伤 风 梭 菌;——— 第 7 部 分 :蛋 白 免 疫 印 迹 法 检 测疯 牛 病 病 原。本 部 分 为 SN/T2206 的 第7 部 分。本 部 分 附 录 A为 规 范 性 附 录。本 部 分 由 国 家 认 证 认 可 监 督 管 理 委 员 会 提 出并 归 口。本 部 分 起 草 单 位 :中 华 人 民 共 和 国 北 京 出入 境 检 验 检 疫 局。本 部 分 主 要 起 草 人 :马 贵 平 、史 喜 菊 、李炎 鑫 、刘 全 国 、李 冰 玲 、刘 旭 辉。本 部 分 系 首 次 发 布 的 检 验 检 疫 行 业 标 准。Ⅰ 犛犖/犜2206 .7—2010化 妆 品 微 生 物 检 测 方 法第 7 部 分 :蛋 白 免 疫 印 迹 法 检 测疯 牛 病 病 原1 范 围SN/T2206 的 本 部 分 规 定 了 进 出口 化 妆 品 中 疯 牛 病 病 原 检 测 ——— 蛋 白 免 疫 印 迹 法。本 部 分 适 用 于 化 妆 品 中 疯 牛 病 病 原 的 检 测。2 规 范 性 引 用 文 件下 列 文 件 中 的 条 款 通 过 SN/T2206的 本 部 分 的 引 用 而 成 为 本 部分 的 条 款 。 凡 是 注 日 期 的 引 用文件 ,其 随 后 所 有 的 修 改 单 (不 包 括 勘 误的 内 容 )或 修 订 版 均 不 适 用 于 本 部 分 ,然而 ,鼓 励 根 据 本 部 分 达 成协 议 的 各 方 研 究 是 否 可 使用 这 些 文 件 的 最 新 版本 。 凡 是 不 注 日 期 的 引用 文 件 ,其 最 新 版 本适 用 于 本部 分。GB/T6682 分 析 实 验 用 水 规 格 和 试 验 方 法GB 19489 实 验 室 生 物 安 全 通用 要 求化 妆 品 卫 生 规 范 (卫 生 部)3 缩 略 语下 列 缩 略 语 适 用 于 SN/T2206的 本 部 分。3.1狑犲狊狋犲狉狀 犫犾狅狋蛋 白 免 疫 印 迹。3.2犘狉犘朊 蛋 白。3.3犘狉犘犮细 胞 型 朊 蛋 白。3.43.53.63.7犘狉犘狊犮致 病 性 朊 蛋 白。犘犓蛋 白 酶 K。犘犕犛犉苯 甲 基 磺 酰 氟。狋狉犻狊犫犪狊犲三 (羟 甲 基 )氨 基 甲 烷。1 犛犖/犜2206 .7—20103.8犛犇犛十 二 烷 基 硫 酸 钠。3.9犛犇犛犘犃犌犈十 二 烷 基 硫 酸 钠聚丙 烯 酰 胺 凝 胶 电 泳。3.103.113.12犘犞犇犉聚 偏 二 氟 乙 烯。犘犅犛磷 酸 盐 缓 冲 盐 水。犈犆犔电 化 学 发 光。4 主 要 仪 器 设 备4.1 生 物 安 全 柜 (2B Ⅱ 型)。4.2 台 式 高 速 离 心 机 (最 高 离 心力 可 达 12 000犵4.3 组 织 匀 浆 机。以 上)。4.4 垂 直 电 泳 系 统 (含 转 印 装 置)。4.5 水 浴 锅 (温 度 可 达 到 100℃ ±1℃)。4.6 恒 温 培 养 箱 (37℃ ±0.5℃)。4.7 X 光 片 洗 片 机。4.8 磁 力 搅 拌 器 和 搅 拌 子 (可 以加 热)。4.9 微 量 可 调 移 液 器(4.10 各 种 冰 箱 (精 度 分别 达 到 4 ℃ ±3℃ 、-20℃ ±5 ℃ 和 -70℃ ±10℃)。4.11 高 压 灭 菌 锅 (温 度可 达 到 135 ℃)。μL 、10 μL 、100 μL 、1 000 μL )和 相 应 吸 头。24.12 PVDF转 印 膜 (0.45μm)。5 方 法 原 理疯 牛 病 的 病 原 是 宿 主 细 胞 编 码 的 一 种正 常 蛋 白 质 的 异 构 体 ,这 种正 常 蛋 白 简 称 为 PrP,其 异 构 体c简 称 为PrP。 正 常 的 PrP对 蛋 白 酶K 敏 感 ,不 致 病 ;但 其 异 构 体 PrP对 蛋 白 酶K 有 抗 性 ,可 致 病 ,称sc c sc为 朊 病 毒 (prion)。将 被 检 化 妆 品 制 备 成 可 溶 性 溶 液 ,分 成 两 等 份 ,一 份 用 蛋 白酶 K 消 化 ,另 一 份 不 用 蛋白 酶 K 消化 ,然 后 进 行 蛋 白 质 电 泳 和 转 印 试 验 ,在 PVDF