GB 12398—1990中华人民共和国国家标准食物中钙的测定方法Method for determination of calcium in foodsGB/T 12398—1990本标准参照采用国际标准 ISO 6490/2—1983《动物饲料——钙含量测定——原子吸收分光光度法》。1主题内容与适用范围本标准规定了用原子吸收分光光度法和滴定法测定食物中钙。本标准适用于各种食物中钙的测定。第一篇原子吸收分光光度法2原理样品经湿消化后，导入原子吸收分光光度计中，经火焰原子化后，吸收422.7nm的共振线，其吸收量与含量成正比，与标准系列比较定量。3试剂要求使用去离子水，优级纯试剂。3．1盐酸（GB 623）。3．2硝酸（GB 626）。3．3高氯酸（GB 623）。3．4混合酸消化液：硝酸与高氯酸比为 4：1。3．50.5N硝酸溶液：量取45mL硝酸，加去离子水并稀释至1 000mL。3．62%氧化镧溶液：称取25g氧化镧（纯度大于99.99%），加75mL盐酸于1000mL容量瓶中，加去离子水稀释至刻度。3．7钙标准溶液：精确称取1.2486g碳酸钙（纯度大于99.99%），加50mL去离子水，加盐酸溶解，移入 1 000mL 容量瓶中，加 2%氧化镧稀释至刻度。贮存于聚乙烯瓶内，4℃保存。此溶液每毫升相当于 500μg钙。3．8钙标准使用液：钙标准使用液的配制见表 1。表1钙标准使用液配制吸取标准 稀释体积标准应用液标准溶液浓度元素钙溶液量 （容量瓶）mL mL浓度μg/mL25稀释溶液2%镧溶液μg/mL5005.0100钙标准使用液配制后，贮存于聚乙烯瓶内，4℃保存。4仪器与设备所用玻璃仪器均以硫酸-重铬酸钾洗液浸泡数小时，再用洗衣粉充分洗刷，后用水反复冲洗，最后用去离子水冲洗晒干或烘干，方可使用。4．1实验室常用设备。4．2原子吸收分光光度计。5操作步骤中华人民共和国卫生部1990—03—19批准1990—12—01实施 GB 12398—19905．1样品处理5．1．1样品制备微量元素分析的样品制备过程中应特别注意防止各种污染。所用设备如电磨、绞肉机、匀浆器、打碎机等必须是不锈钢制品。所用容器必须使用玻璃或聚乙烯制品，做钙测定的样品不得用石磨研碎。湿样（如蔬菜、水果、鲜鱼、鲜肉等）用水冲洗干净后，要用去离子水充分洗净。干粉类样品（如面粉、奶粉等）取样后立即装容器密封保存，防止空气中的灰尘和水分污染。5．1．2样品消化精确称取均匀样品干样0.5～1.5g（湿样2.0～4.0g，饮料等液体样品5.0～10.0g）于250mL高型烧杯，加混合酸消化液20～30mL，上盖表皿。置于电热板或电沙浴上加热消化。如未消化好而酸液过少时，再补加几毫升混合酸消化液，继续加热消化，直至无色透明为止。加几毫升去离子水，加热以除去多余的硝酸。待烧杯中的液体接近 2～3mL 时，取下冷却。用去离子水洗并转移于 10mL刻度试管中，加去离子水定容至刻度（测钙时用 2%氧化镧溶液稀释定容）。取与消化样品相同量的混合酸消化液，按上述操作做试剂空白试验测定。5．2测定将钙、标准使用液分别配制不同浓度系列的标准稀释液，见表2，测定操作参数见表3。表2不同浓度系列标准稀释液的配制方法稀释体积使用液浓度 吸取使用液量标准系列浓度μg/mL元素钙（容量瓶）mL稀释溶液2%镧溶液μg/mLmL123460.5125501.523表3测定操作参数元素钙波长nm光源可见火焰标准系列浓度范围 稀释溶液μg/mL422.7空气-乙炔0.5～3.02%镧溶液其他实验条件：仪器狭缝、空气及乙炔的流量、灯头高度、元素灯电流等均按使用的仪器说明调至最佳状态。将消化好的样液、试剂空白液和各元素的标准浓度系列分别导入火焰进行测定。5．3计算5．3．1标准曲线法以各浓度系列标准溶液与对应的吸光度绘制标准曲线。钙标准曲线如图1所示。它的线性相关系数为 0.999 6。中华人民共和国卫生部1990—03—19批准1990—12—01实施 GB 12398—1990图1钙标准曲线测定用样品液及试剂空白液由标准曲线查出浓度值（c 及c0），再按式（1）计算。X = (c ? c0)×V× f×100…………………………………………（1）m×1000式中：X——样品中元素的含量，mg/100g；c——测定用样品中元素的浓度（由标准曲线查出），μg/mL；c0——试剂空白液中元素的浓度（由标准曲线查出），μg/mL；V——样品定容体积，mL；f——稀释倍数；m——样品质量，g；100 ——折算成每百克样品中元素的含量以 mg计。10005．3．2回归方程法由各元素标准稀释液浓度与对应的吸收度计算出回归方程（也可以输入计算器得出回归方程）。计算见式（2）。c = ay + b……………………………………………………（2）式中：c——测定用样品中元素浓度（可由计算器直接得出，μg/mL）；a——曲线斜率；y——元素的吸收度；b——曲线截距。由回归方程或计算器得出的测定样液及试剂空白液的浓度后，再由式（3）计算。X = (c ? c0)×V× f×100………………………………………（3）m×1000式中各字母的意义同曲线法说明。5．3．3结果的重复性同实验室平行测定或连续两次测定结果的重现性钙小于 10%。最低检测限：钙0.1μg。中华人民共和国卫生部1990—03—19批准1990—12—01实施 GB 12398—1990第二篇滴定法（EDTA法）6原理钙与氨羧络合剂能定量地形成金属络合物，其稳定性较钙与指示剂所形成的络合物为强。在适当的 pH值范围内，以氨羧络合剂 EDTA滴定，在达到当量点时，EDTA就自指示剂络合物中夺取钙离子，使溶液呈现游离指示剂的颜色（终点）。根据EDTA络合剂用量，可计算钙的含量。7试剂要求使用去离子水，优级纯试剂。7．11.25mol/L氢氧化钾溶液：精确称取 71.13g氢氧化钾，用去离子水稀释至1 000mL。7．21%氰化钠溶液：称取1.0g氰化钠，用去离子水稀释至