GB 12396—1990中华人民共和国国家标准食物中铁、镁、锰的测定方法Method for determination of iron, magnesiumand manganese in foodsGB/T 12396—19901主题内容与适用范围本标准规定了用原子吸收分光光度法测定食物中铁、镁及锰。本标准适用于各种食物中铁、镁及锰的测定。2原理样品经湿消化后，导入原子吸收分光光度计中，经火焰原子化后，铁、镁、锰分别吸收 248.3nm、285.2nm、279.5nm 的共振线，其吸收量与它们的含量成正比，与标准系列比较定量。3试剂要求使用去离子水，优级纯试剂。3．1盐酸（GB 622）。3．2硝酸（GB 626）。3．3高氯酸（GB 623）。3．4混合酸消化液：硝酸与高氯酸比为 4：1。3．50.5mol/L硝酸溶液：量取45mL硝酸，加去离子水并稀释至1 000mL。3．6标准溶液铁、镁、锰标准溶液：精确称取金属铁、金属镁、金属锰（纯度大于99.99%）各1.000 0g，或含1.000 0g纯金属相对应的氧化物。分别加硝酸溶解，移入三只 1 000mL 容量瓶中，加 0.5N 硝酸溶液并稀释至刻度。贮存于聚乙烯瓶内，4℃保存。此三种溶液每毫升各相当于 1mg铁、镁、锰。3．7标准应用液铁、镁、锰标准使用液的配制见表 1。表1标准使用液配制稀释体积 标准使用（容量瓶） 液浓度 稀释溶液标准溶液浓度 吸取标准溶液量μg/mLmL元素mLμg/mL100铁镁锰1 0001 0001 00010.05.01001001000.5mol/L硝酸溶液5010.0100铁、镁、锰标准使用液配制后，贮存于聚乙烯瓶内，4℃保存。4仪器与设备所有玻璃仪器均以硫酸-重铬酸钾洗液浸泡数小时，再用洗衣粉充分洗刷，后用水反复冲洗，最后用去离子水冲洗晒干或烘干，方可使用。中华人民共和国卫生部1990—03—19批准1990—12—01实施 GB 12396—19904．1实验室常用设备。4．2原子吸收分光光度计。5操作步骤5．1样品处理5．1．1样品制备：微量元素分析的样品制备过程中应特别注意防止各种污染。所用设备如电磨、绞肉机、匀浆器、打碎机等必须是不锈钢制品。所用容器必须使用玻璃或聚乙烯制品。湿样（如蔬菜、水果、鲜鱼、鲜肉等）用水冲洗干净后，要用去离子水充分洗净。干粉类样品（如面粉、奶粉等）取样后立即装容器密封保存，防止空气中的灰尘和水分污染。5．1．2样品消化：精确称取均匀样品干样0.5～1.5g（湿样2.0～4.0g，饮料等液体样品5.0～10.0g）于250mL高型烧杯中，加混合酸消化液20～30mL，上盖表皿。置于电热板或电沙浴上加热消化。如未消化好而酸液过少时，再补加几毫升混合酸消化液，继续加热消化，直至无色透明为止。加几毫升去离子水，加热以除去多余的硝酸。待烧杯中的液体接近 2～3mL时，取下冷却。用去离子水洗并转移于10mL刻度管中，加去离子水定容至刻度（测钙时用2%氧化镧溶液稀释定容）。取与消化样品相同量的混合酸消化液，按上述操作做试剂空白试验测定。5．2测定将铁、镁、锰标准使用液分别配制不同浓度系列的标准稀释液方法见表 2，测定操作参数见表3。表2不同浓度系列标准稀释液的配制方法稀释体积使用液浓度吸取使用液量标准系列浓度μg/mL元素铁（容量瓶）mL稀释溶液μg/mLmL0.510.510.5mol/L硝酸溶液1002100500200233440.510.050.10.20.30.40.250.510.5mol/L硝酸溶液镁锰502340.510.5mol/L硝酸溶液100231.524表3测定操作参数中华人民共和国卫生部1990—03—19批准1990—12—01实施 GB 12396—1990火焰波长nm标准系列浓度范围μg/mL0.5～4.0元素光源稀释溶液铁镁锰248.3285.2279.5紫外紫外紫外0.5mol/L硝酸溶液空气-乙炔0.05～1.00.25～2.0其他实验条件：仪器狭缝、空气及乙炔的流量、灯头高度、元素灯电流等按使用的仪器说明调至最佳状态。将消化好的样液、试剂空白液和各元素的标准浓度系列分别导入火焰进行测定。5．3计算5．3．1标准曲线法以各浓度系列标准溶液与对应的吸光度绘制标准曲线。铁、镁、锰的标准曲线如图1、图2、图3所示。它们的线性相关系数分别为：0.999 6，0.9998，0.999 1。图1铁标准曲线图2镁标准曲线中华人民共和国卫生部1990—03—19批准1990—12—01实施 GB 12396—1990图3锰标准曲线测定用样品液及试剂空白液由标准曲线查出浓度值（c 及c0），再按式（1）计算。X = (c ? c0)×V× f×100……………………………………（1）m×1000式中：X——样品中元素的含量，mg/100g；c——测定用样品中元素的浓度（由标准曲线查出），μg/mL；c0——试剂空白液中元素的浓度（由标准曲线查出），μg/mL；V——样品定容体积，mL；f——稀释倍数；m——样品质量，g；100 ——折算成每百克样品中元素的含量以 mg计。10005．3．2回归方程法由各元素标准稀释液浓度与对应的吸光度计算出回归方程（也可以输入计算器得出回归方程）。计算见式（2）。c = ay + b…………………………………………………………（2）式中：c——测定用样品中元素的浓度（可由计算器直接得出），μg/mL；a——曲线斜率；y——元素的吸收度；b——曲线的截距。由回归方程或计算器得出测定样液及试剂空白液的浓度后，再由式（3）计算。X = (c ? c0)×V× f×100………………………………………（3）m×1000式中各字母的含义同曲线法说明。中华人民共和国卫生部1990—03—19批准1990—12—01实施 GB 12396—19905．3．3结果的重复性同实验室测定或连续两次测定结果的