ICS65.020.40 B61 D B 32 备案号： 江 苏省地方标准 DB32/T1798—2011 秤锤树组织培养繁殖技术规程 TechnicalRegulationsofmicropropagationfor SinojackiaxylocarpaHu 2011-06-15发布 2011-08-15实施 发布 江苏省质量技术监督局  DB32/T1798—2011 前 言 本标准按GB/T1.1-2009《标准化工作导则第1部分：标准的结构和编写》的规定编写。 本标准由江苏省林业局提出并归口。 本标准起草单位：江苏省林业科学研究院。 本标准主要起草人：蒋泽平、黄利斌、窦全琴、张敏、蒋春。 I  DB32/T1798—2011 秤锤树组织培养繁殖技术规程 1范围 本标准规定了秤锤树组织培养繁殖中外植体选择与灭菌、初代培养、增殖培养、壮苗培养、生根培 养、繁殖代数、炼苗移栽、移栽成活苗管理等要求。 本标准适用于秤锤树组织培养规模化繁殖。 2外植体选择与灭菌 2.1外植体选择 当年生健壮植株枝条或萌条的半木质化新梢长5cm～10cm。 2.2外植体处理 将半质化枝条切割成每段2cm～3cm的带芽茎段。 2.3外植体灭菌 枝条去叶毛，用软毛刷蘸液体皂轻刷干净，流水冲洗30min。将处理好的外植体在超净工作台上用 70%酒精溶液浸泡30s～50s，然后转移至0.1%升汞溶液中消毒8min～10min，最后用无菌水冲洗3次～ 5次，接种于培养基中。 3初代培养 3.1培养基 MS基本培养基附加BA2.0mg.L 3.2培养条件 温度25℃，光照强度2000lx，每日光照12h，培养40d后进入增殖培养。 3.3接种 +IBA0.05mg.L。 -1-1 将经过灭菌的外植体，按芽朝上的方向插入培养基。 4增殖培养 4.1培养基 MS基本培养基附加BA1.0mg.L 4.2培养条件 -1 +TDZ0.05mg.L＋IBA0.05mg.L＋VC50mg.L＋S3%。 -1-1-1 1  DB32/T1798—2011 温度(25±2)℃，光照强度3000lx，每日光照14h。 4．3培养方法 在培养过程中，试管苗生长较弱时,将BA换成相同浓度的ZT使用。 5壮苗培养 5.1培养基 MS基本培养基附加BA0.5mg.L+TDZ0.05mg.L+IBA0.1mg.L+VC50mg.L＋S3%。 -1 -1-1 5.2培养条件 温度(27±2)℃，光照强度3000lx，每日光照14h。 5.3培养方法 在培养过程中，试管苗生长较弱时,将BA换成相同浓度的ZT使用。 6生根培养 6.1培养基 -1 1/2MS（大量元素减半，其他成分不变）基本培养基附加NAA0.3mg.L+IBA0.5mg.L+VC -1 -1 100mg.L＋S2%。 -1 6.2培养条件 温度(23±2)℃，光照强度3000lx，每日光照14h。 6.3培养方法 培养7d～15d长出0.5～1.0cm长的新根时，开始炼苗。 7繁殖代数 连续繁殖25代～30代，不能继续繁殖。需取外植体重新接种培养。 8炼苗移栽 8.1移栽温室 温室使用前彻底消毒，用硫磺、百菌清烟雾剂熏蒸3-4次，温室使用后3个月左右用来苏水消毒。 8.2炼苗 在生根培养7d～15d长出0.5～1.0cm长的新根时开始炼苗，打开瓶口室内炼苗3d。 8.3移栽基质 蛭石:珍珠岩:泥炭=6:3:1（体积）的混合基质。 2  DB32/T1798—2011 8.4移栽方法 先将试管苗取出，在流动的清水中冲洗。移栽至含有蛭石:珍珠岩:泥炭=6:3:1（体积）的 混合基质的营养钵中。 8.5移栽条件 控制温度25℃～30℃,相对湿度85%-90%,保湿15d～20d,其间采用遮光率80%～90%遮光网遮 荫,35d后成活。 9移栽成活苗管理 9.1大田栽植时间 试管苗移栽后60天大田栽植。 9.2肥、水管理 移栽成活苗喷施0.5‰的N∶P∶K=1∶1∶2的复合肥营养液，10d追施1次；基质不宜太湿，以攥 在手中指间不滴水为原则，喷水与施肥相结合。 9.3病虫害防治 病害以预防为主，可用0.3%波尔多液或700～1000倍的50%多菌灵或75%的托布津喷施防治。晴天 每月喷施1次，低温阴雨天半个月喷施1次，发生病害时，每周喷施1次。 3