ICS65. 020. 20 DB21 B21 辽 宁省地方标准 DB 21/ T2451—2015 玉米品种真实性鉴定SSR分子检测方法 Maize variety genuineness verificationwith SSR markers 2015 -04 -01发布 2015 -06 -01实施 辽宁省质量技术监督局 发布  DB21/ T2451—2015 目 次 前言. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .I I 1 范围.. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .1 2 规范性引用文件.. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .1 3 术语、定义和缩略语.. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .1 4 方法原理.. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .2 5 仪器设备、试剂和溶液配制.. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .2 6 检测步骤.. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .3 7 结果分析和表示.. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .6 8 结果判定.. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .6 附录 A（规范性附录）核心引物名称和序列 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .7 附录 B（规范性附录）溶液配制 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .9 I  DB21/ T2451—2015 前 言 本标准按照GB/ T1. 1- 2009给出的规则起草。 本标准由辽宁省农村经济委员会提出并归口。 本标准起草单位：辽宁省种子管理局。 本标准起草人：朱志成、李波、高振环、邹畅、肖国峰、王汝宝、李洪建、赵前程、王见中、温浩、 李鹏、史鸿儒、安辉、徐策、孙丽红、王东坡。 I I  DB21/ T2451—2015 玉米品种真实性鉴定SSR分子检测方法 1 范围 本标准规定了玉米品种真实性鉴定的原理、仪器设备、检测步骤及结果判定。 本标准适用于玉米品种真实性 SSR分子鉴定。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/ T3543. 2 农作物种子检验规 程扦样 GB/ T6682 分析实验室用水规格和试验方法 3 术语、定义和缩略语 3. 1 术语和定义 下列术语和定义适用于本标准。 3. 1. 1 品种真实性 供检样品与该品种的对照样品是否相符。 3. 1. 2 对照样品 省级以上种子管理部门收集并保存的与品种名称相符的种子样品。 3. 1. 3 参照品种 已知等位变异 SSR位点的品种。 3. 1. 4 SSR分子检测 通过 SSR分子标记检测玉米品种基因组 DNA的差异，鉴定玉米品种真实性的检测方法。 3. 2 缩略语 1  DB21/ T2451—2015 CTAB：cetyltrimethylammonium bromide，十六烷基三甲基溴化铵。 DNA：deoxyribonucleic acid，脱氧核糖核酸。 dNTPs：deoxyribonucleoside triphosphates，脱氧核苷三磷酸。 PAGE：polyacrylamide gel electrophoresis，聚丙烯酰胺凝胶电泳。 PCR：polymerase chain reaction，聚合酶链式反应。 SDS：sodium d