附件3
保健食品中巴比妥类化学成分的快速检测
胶体金免疫层析法
（KJ201903）
1 范围
本方法规定了保健食品中巴比妥类化学成分的胶体金免疫层析快速检测方法。
本方法适用于硬胶囊、软胶囊、丸剂、片剂、散剂及口服液等保健食品中巴比妥类化学成分的快速测定。
2 原理
本方法采用竞争抑制免疫层析原理。样品中的巴比妥类化学成分经提取后与胶体金标记的特异性抗体结合，抑制了抗体和检测线（T线）上抗原的结合，从而致使检测线不显色。通过检测线的显色与否判读，定性判定样品中是否含有巴比妥类化学成分。
3 试剂和材料
除另有规定外，本方法所用试剂均为分析纯，水为GB/T 6682规定的二级水。
3.1 试剂：
3.1.1 无水乙醇。
3.1.2 提取液：将无水乙醇（3.1.1）与水按照体积比10:90混匀。
3.1.3 甲醇。
3.2 参考物质
3.2.1本方法所用巴比妥、苯巴比妥、异戊巴比妥、司可巴比妥钠等参考物质的中文名称、英文名称、CAS登录号、分子式、相对分子量见表1，纯度≥95%。
表1 参考物质的中文名称、英文名称、CAS登录号、分子式、相对分子量
中文名称
英文名称
CAS登录号
分子式
相对分子量
巴比妥
Barbital
57-44-3
C8H12N2O3
184.19
苯巴比妥
Phenobarbital
50-06-6
C12H12N2O3
232.24
异戊巴比妥
Amobarbital
57-43-2
C11H18N2O3
226.27
司可巴比妥钠
Secobarbital
76-73-3
C12H17N2O3
238.28
注：或等同可溯源物质。
3.3 标准溶液的配制
3.3.1 巴比妥类标准储备液（0.5 mg/mL）：精密称取巴比妥（或苯巴比妥，异戊巴比妥，司可巴比妥钠）标准品（3.2.1）适量，置于10mL容量瓶中，加入适量甲醇（3.1.3）超声溶解后，用甲醇稀释至刻度，摇匀，制成浓度为0.5 mg/mL的巴比妥类标准储备液。﹣20 ℃避光保存，有效期6个月。
3.3.2 巴比妥类标准中间液（50 μg/mL）：精密量取巴比妥类标准储备液（0.5 mg/mL）（3.3.1）1mL，置于10mL容量瓶中，用甲醇（3.1.3）稀释至刻度，摇匀，制成浓度为50 μg/mL的巴比妥类标准中间液。
3.4材料
3.4.1免疫胶体金免疫层析试剂盒，适用于保健食品硬胶囊、软胶囊、丸剂、片剂、散剂及口服液。
3.4.1.1检测卡。
4 仪器和设备
4.1 离心管：15mL。
4.2 涡旋混合器。
4.3 剪刀。
4.4 塑料吸管。
4.5 电子天平：感量为0.01 g。
4.6 离心机：转速≥4000r/min，转子配套15mL离心管。
4.7移液器：200μL
4.8环境条件：温度15℃～35℃，湿度≤80%。
5.分析步骤。。。。。。以下内容略