Analysis of antibiotics 第十一章抗生素类药物的分析 药物分析教研室 Company Logo www.themegallery Contents Company Logo www.themegallery 第一节 概述 1.抗生素（antibiotics） 在低微浓度下即可对某些生物（病原微生物）的生命活动有特异抑制作用的化学物质的总称 Company Logo www.themegallery 第一节 概述 3.来源 生物合成（发酵） 化学合成或半合成 4.特点 化学纯度较低 活性组分易发生变异 稳定性差 Company Logo www.themegallery 第一节 概述 5.抗生素质量分析——生物学法、物理化学法 鉴别：理化方法、微生物法 检查：水分、pH值、异常毒性、热原、细菌内毒素、降压物质等 含量/效价测定： 微生物法 ： 与临床疗效吻合,灵敏度高，结果直观，适用范围广；但操作复杂费时，误差大 理化方法：准确度与专属性较高, 且操作简便；但与临床疗效有偏差 Company Logo www.themegallery 第二节 β–内酰胺类 Company Logo www.themegallery 第二节 β–内酰胺类 Company Logo www.themegallery 第二节 β–内酰胺类 氢化噻唑环 氢化噻嗪环 ＊ ＊ ＊ ＊ Company Logo www.themegallery 第二节 β–内酰胺类 一、结构与性质 1.酸性（羧基） pKa 2.5-2.8，酸性较强。碱金属盐水溶性好，有机碱盐难溶于水。 Company Logo www.themegallery 第二节 β–内酰胺类 2.手性C （旋光性） ﹡ ﹡ ﹡ ﹡ ﹡ 3.UV 青霉素类：苯环取代基 头孢菌素类：母核有共轭结构 260nm Company Logo www.themegallery 4. β–内酰胺环(四元环张力+酰胺键 ) 第二节 β–内酰胺类 干燥条件较稳定，溶液不稳定 某些氧化剂、金属离子、温度 Company Logo www.themegallery 第二节 β–内酰胺类 二、Identification Company Logo www.themegallery 第二节 β–内酰胺类 Company Logo www.themegallery 第二节 β–内酰胺类 Company Logo www.themegallery 第二节 β–内酰胺类 头孢利定的NMR鉴别法(JP14) 取本品50mg溶于0.5ml重水中，测定NMR光谱时，应显示 δ3.8 附近 δ6.9～7.5 δ7.9～9.0 单峰信号 多重峰信号 多重峰信号 2 ： 3 ： 5 Company Logo www.themegallery 第二节 β–内酰胺类 (三)呈色反应 1）异羟肟酸铁反应——β–内酰胺环 2）茚三酮反应——α-氨基 Company Logo www.themegallery 第二节 β–内酰胺类 α 3）双缩脲反应——β–内酰胺类 Company Logo www.themegallery 第二节 β–内酰胺类 4）变色酸-硫酸反应 5）重氮苯磺酸反应——酚羟基 6）铜盐反应 Company Logo www.themegallery 7）硫酸-甲醛反应(BP) 第二节 β–内酰胺类 青霉素钾和青霉素钠呈红棕色 (四)焰色反应——K+、Na+ 三、Purity Test(聚合物、有关物质、异构体等) 1.聚合物 头孢他啶中聚合物测定 Company Logo www.themegallery 第二节 β–内酰胺类 色谱条件与系统适用性试验 用葡聚糖凝胶G-10（40～120?m）为填充剂，玻璃柱内径1.3～1.6cm，床体积50～60ml；流动相A为含3.5%硫酸铵的0.1mol/L磷酸盐缓冲液（取磷酸氢二钠2.19g和磷酸二氢钠0.54g，加水100ml使溶解，调节pH至7.0），流动相B为水；流速为0.8ml/min；检测波长为254nm。以流动相A为流动相，用0.1mg/ml蓝色葡聚糖2000溶液进样200?l进行测定，理论板数应不低于900，拖尾因子在0.75～1.5。两种流动相系统中蓝色葡聚糖的保留时间比应在0.93～1.07之间。对照品溶液以流动相B为流动相，重复进样200?l，峰面积值的相对标准差应小于5.0%。 对照品溶液的制备 取头孢他啶对照品适量，精密称定，加水制成每1ml中含头孢他啶100?g的溶液，摇匀 Company Logo www.themegallery 第二节 β–内酰胺类 测定法 取本品适量，精密称定，加水制成每1ml中约含头孢他啶20mg的溶液，立即进样200?l，以流动相A为流动相进行测定，记录色谱图；另取对照品溶液200?l注入液相色谱仪，以流动相B为流动相，记录色谱图，按外标法计算，本品含头孢他啶聚合物以头孢他啶计不得过0.3% 主成分自身对照法 面积归一化法 限量法 自身对照外标法