中华人民共和国国家标准GB5009.86—2016食品安全国家标准食品中抗坏血酸的测定2016-08-31发布2016-09-20实施中华人民共和国发布国家卫生和计划生育委员会GB5009.86—2016前言本标准代替 /—《蔬菜水果及其制品中总抗坏血酸的测定(荧光法和24-,二硝基GBT5009.159—2003《食品中还原型抗坏血酸的测定 》和GB6195—1986《水果蔬菜维生素C含量测定法(,26-二氯靛酚滴定法 )》本标准与 /GBT5009.86 2003苯肼法)》 /GBT5009.86—2003相比,主要变化如下 :———标准名称修改为 “食品安全国家标准 食品中抗坏血酸的测定 ”;———扩大了方法的适用范围 ;———增加了高效液相色谱法及相关方法的定量限;———删除了24-,二硝基苯肼法 ;———增加了26-,二氯靛酚滴定法 ;GBT20001.4—2015对原标准的结构进行了修改 ———按照 /ⅠGB5009.86—2016食品安全国家标准食品中抗坏血酸的测定范围1本标准规定了高效液相色谱法 荧光法,26-二氯靛酚滴定法测定食品中抗坏血酸的方法 本标准第一法适用于乳粉 谷物蔬菜水果及其制品 肉制品维生素类补充剂 果冻胶基糖果八宝粥葡萄酒中的 L(+-)抗坏血酸(D+-)抗坏血酸和 L(+-)抗坏血酸总量的测定第二法适用于乳粉蔬菜水果及其制品中 L(+-)抗坏血酸总量的测定 第三法适用于水果 蔬菜及其制品中 L(+-)抗坏血酸的测定 术语和定义2抗坏血酸:一种具有抗氧化性质的有机化合物又称为“维生素C”,是人体必需的营养素之一2.12.2 L(+-)抗坏血酸:左式右旋光抗坏血酸 具有强还原性 ,对人体具有生物活性 2.3 D(+-)抗坏血酸:又称异抗坏血酸 具有强还原性 ,但对人体基本无生物活性 2.4 L(+-)脱氢抗坏血酸 :(L+-)抗坏血酸极易被氧化为 L(+-)脱氢抗坏血酸,(L+-)脱氢抗坏血酸亦可被还原为 L(+-)抗坏血酸通常称为脱氢抗坏血酸 ( )抗坏血酸总量:将试样中L(+-)脱氢抗坏血酸还原成的L(+-)抗坏血酸或将试样中2.5 L+-L(+-)抗坏血酸氧化成的 L(+-)脱氢抗坏血酸后测得的 L(+-)抗坏血酸总量 第一法高效液相色谱法原理3试样中的抗坏血酸用偏磷酸溶解超声提取后,以离子对试剂为流动相,经反相色谱柱分离,其中L(+-)抗坏血酸和 D(+-)抗坏血酸直接用配有紫外检测器的液相色谱仪(波长245nm)测定; 试样中的L(+-)脱氢抗坏血酸经 L-半胱氨酸溶液进行还原后 ,用紫外检测器 (波长245nm)测定L(+-)抗坏血酸总量,或减去原样品中测得的 L(+-)抗坏血酸含量而获得 L(+-)脱氢抗坏血酸的含量 以色谱峰的保留时间定性 ,外标法定量试剂和材料4除非另有说明 ,本方法所用试剂均为分析纯 ,水为GBT6682/ 规定的一级水试剂4.1偏磷酸(HPO):含量(以HPO3计)≥38%4.1.14.1.24.1.33n磷酸三钠()·NaPO 12HO342磷酸二氢钾()4KHPO21GB5009.86—2016磷酸( ):HPO 85%4.1.4344.1.5 L-半胱氨酸():优级纯2CHNOS3 74.1.6十六烷基三甲基溴化铵(C19H42BrN):色谱纯甲醇():色谱纯CHOH34.1.7试剂配制4.2偏磷酸溶液(200gL/):称取200g(精确至0.1g)偏磷酸(4.1.1),溶于水并稀释至1L,此溶液保4.2.1存于4℃的环境下可保存一个月 4.2.2偏磷酸溶液(20gL/):量取50mL200gL磷酸三钠溶液(100gL/):称取100g(精确至0.1g)磷酸三钠,溶于水并稀释至 1L/偏磷酸溶液,用水稀释至500mL4.2.34.2.4 L-半胱氨酸溶液(/):称取半胱氨酸,溶于水并稀释至 100mL临用时配制40gL 4gL-标准品4.34.3.1 L(+-)抗坏血酸标准品 (CHO):纯度≥99%6 864.3.2 D(+-)抗坏血酸(异抗坏血酸)标准品(CHO):纯度≥99%6 86标准溶液配制4.44.4.1 L(+-)抗坏血