中华人民共和国国家标准GB5009.258—2016食品安全国家标准食品中棉子糖的测定2016-08-31发布2016-09-20实施中华人民共和国发布国家卫生和计划生育委员会GB5009.258—2016食品安全国家标准食品中棉子糖的测定范围1本标准规定了食品中棉子糖含量测定的离子色谱方法本标准适用于婴幼儿配方食品 婴幼儿谷类辅助食品 婴幼儿罐装辅助食品饮料及豆粉食品中棉子糖含量的测定 原理2试样采用乙腈沉淀 高速离心的方式去除样品中的蛋白质和 脂肪,经固相萃取柱净化后, 注入离子色谱仪,氢氧化钠溶液为淋洗液 ,经阴离子交换柱分离,脉冲安培检测器检测保留时间定性, 外标法定量试剂和材料3除非另有说明 ,本方法所用试剂均为优级纯 ,水为GBT6682/ 规定的一级水试剂3.1乙腈( ):色谱纯CHN2 33.1.13.1.2 50%氢氧化钠溶液(NaOH):色谱纯3.1.3 α-淀粉酶:酶活力≥1.5U/mg3.1.4氮气(N2):纯度≥99.99%试剂配制3.2氢氧化钠溶液(250mmolL/):在2L塑料试剂瓶中加入500mL经过0.22μm尼龙滤膜过滤的蒸馏水,移取13.1mL氢氧化钠(3.1.2)溶液至水面以下,加蒸馏水至1000mL,通入氮气保护后,摇匀备用标准品3.3棉子糖标准品(CH O18 3216):纯度≥99.0%标准溶液配制3.43.4.1标准储备溶液(1000mgL/):准确称取棉子糖 100mg(精确到0.1mg)于50mL烧杯中,用蒸馏水溶解,转移到100mL容量瓶中,用水定容摇匀,4℃保存,有效期为1个月标准使用溶液(50.0mgL/):准确吸取5mL标准储备溶液于100mL容量瓶中,用蒸馏水定容3.4.2至刻度现用现配标准系列工作溶液:分别准确吸取棉子糖标准使用溶液0mL1mL2mL5mL10mL 3.4.31GB5009.258—201620mL50mL于100mL容量瓶中,用蒸馏水定容 得到标准曲线工作溶液浓度分别为0.000mgL/0.500mgL1.00mgL2.50mgL5.00mgL10.0mgL25.0mgL// /// /仪器和设备4离子色谱仪:配置脉冲安培检测器 4.14.2天平:感量为0.1mg离心机:转速≥10000rmin/涡旋混合器4.34.44.54.64.74.8超声波清洗器 固相萃取装置 培养箱:60℃±2℃固相萃取柱:OnGuardⅡRP柱(填料为反相聚二乙烯基苯聚合物)和OnGuardⅡH柱( 填料为,H型聚苯乙烯基强酸树脂 ),或其他等效柱 规格为1.0mL,H柱为650mgRP柱为350mg4.9 0.22μm水性滤膜针头滤器 注射器:15mL4.10分析步骤5试样制备5.1试样预处理5.1.15.1.1.1乳粉米粉豆粉等试样:取试样约100g(其他固体试样先进行粉碎研磨),装入能够容纳2倍试样体积的带盖容器中 ,通过反复摇晃和颠倒容器使试样充分混匀直到使试样均一化 液体试样:取试样约100mL,装入能够容纳2倍试样体积的带盖容器中,通过反复摇晃和颠5.1.1.2倒容器使试样充分混匀直到使试样均一化5.1.1.3肉泥等其他半固体试样 :称取试样,称取等量的水与之混合 ,涡旋混匀,超声20min50.0g试样处理5.25.2.1米粉等含淀粉的试样:称取混合均匀的试样 1g~5g(精确至0.1mg,含有棉子糖约为 20mg)于离心管中,加入1gα-淀粉酶,固体试样需用约50mL45℃~50℃的水使其溶解 ,混合均匀后充氮 ,盖上管盖,置于60℃±2℃培养箱内酶解 30min冷却至室温后 ,用水定容至100mL乳粉豆粉饮料肉泥等其他试样 :称取混合均匀的试样1g~5g(精确至0.1mg,含有棉子糖5.2.2约为20mg)于100mL烧杯中,加水溶解,固体试样需用约50mL45℃~50℃的水使其溶解 ,转移到100mL容量瓶中,用水定容净化5.35.3.1吸取5mL经过处理的试样溶液于50mL具塞锥形瓶中 ,加入10mL水,摇匀,超声30min,转移到50mL容量瓶中,加入30mL乙腈,用水定容转移到50mL离心管中,于10min,