中华人民共和国国家标准GB5009.209—2016食品安全国家标准食品中玉米赤霉烯酮的测定2016-12-23发布2017-06-23实施中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会国家食品药品监督管理总局发布GB5009.209—2016前言GBT5009.209—2008《谷物中玉米赤霉烯酮的测定》/本标准代替 /GBT23504 2009—《 食品中玉米赤霉烯酮的测定免疫亲和层析净化高效液相色谱法 》 /—《动物源食品中玉米赤霉GBT21982 2008醇β-玉米赤霉醇α-玉米赤霉烯醇 β-玉米赤霉烯醇 玉米赤霉酮和玉米赤霉烯酮残留量检测方法液相色谱-质谱/质谱法》SN/T1745—2006《进出口大豆油菜籽和食用植物油中玉米赤霉烯酮的检验方法》SN/T1772—2006《进出口粮谷中玉米赤霉烯酮的测定 免疫亲和柱-液相色谱法》GBT5009.209—2008相比,主要变化如下 :本标准与 /———标准名称修改为 “食品安全国家标准 食品中玉米赤霉烯酮的测定 ”;———增加了适用范围 ;———增加了荧光光度法作为第二法 ;———增加了固相萃取柱净化液相色谱 -质谱法作为第三法 ⅠGB5009.209—2016食品安全国家标准食品中玉米赤霉烯酮的测定范围1本标准规定了食品中玉米赤霉烯酮的测定方法本标准第一法适用于粮食和粮食制品,酒类,酱油醋酱及酱制品,大豆油菜籽食用植物油中玉米赤霉烯酮的测定 ,第二法适用于大豆油菜籽食用植物油中玉米赤霉烯酮的测定,第三法适用于牛肉猪肉牛肝牛奶鸡蛋中玉米赤霉烯酮的测定第一法液相色谱法原理2用乙腈溶液提取试样中的玉米赤霉烯酮,经免疫亲和柱净化后,用高效液相色谱荧光检测器测定,外标法定量试剂和材料3除非另有说明 ,本方法所用试剂均为分析纯 ,水为GBT6682/ 规定的一级水试剂3.1甲醇():色谱纯CHOH33.1.13.1.23.1.33.1.43.1.53.1.6乙腈( ):色谱纯CHCN3氯化钠(NaCl)氯化钾(KCl)磷酸氢二钠()4NaHPO2磷酸二氢钾()4KHPO2吐温 (3.1.7 -20CH O58 11426)盐酸(HCl)3.1.8试剂配制3.2提取液:乙腈-水(9+1)3.2.13.2.2 PBS清洗缓冲液:称取8.0g氯化钠1.2g磷酸氢二钠0.2g磷酸二氢钾0.2g氯化钾,用至,用水定容至1L990mL水将上述试剂溶解,用盐酸调节pH7.03.2.3 PBS/吐温-20缓冲液:称取8.0g氯化钠1.2g磷酸氢二钠0.2g磷酸二氢钾0.2g氯化钾,用吐温,用水定容至1L900mL水将上述试剂溶解 ,用盐酸调节pH至7.0,加入1mL -20标准品3.3玉米赤霉烯酮(CH O CAS 17924-92-4),纯度≥98.0%或经国家认证并授予标准物质证,号:18 2251GB5009.209—2016书的标准物质 标准溶液配制3.43.4.1标准储备液:准确称取适量的标准品(精确至0.0001g),用乙腈溶解,配制成浓度为/100gmLμ的标准储备液 ,-18℃以下避光保存 3.4.2系列标准工作液 :根据需要准确吸取适量标准储备液 ,用流动相稀释 ,配制成10ngmL50ng/////mL100ngmL200ngmL500ngmL的系列标准工作液 ,4℃避光保存材料3.53.5.1玉米赤霉烯酮免疫亲和柱:柱规格1mL或3mL,柱容量≥1500ng,或等效柱3.5.2玻璃纤维滤纸 :直径11cm,孔径1.5μm,无荧光特性仪器和设备4高效液相色谱仪 :配有荧光检测器 高速粉碎机:转速≥12000rmin/均质器:转速≥12000rmin/4.14.24.34.44.54.64.7高速均质器:转速氮吹仪/18000rmin~22000rmin/空气压力泵玻璃注射器:10mL4.8天平:感量0.0001g和0.01g分析步骤提取55.1粮食和粮食制品5.1.1称取40.0g粉碎试样(精确到0.1g)于均质杯中,加入4g氯化钠和100mL提取液, 以均质器(4.3)