中华人民共和国国家标准GB5009.189—2016食品安全国家标准食品中米酵菌酸的测定2016-12-23发布2017-06-23实施中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会国家食品药品监督管理总局发布GB5009.189—2016前言GBT5009.189—2003《银耳中米酵菌酸的测定 》本标准代替 /GBT5009.189—2003相比,主要变化如下 :本标准与 /———标准名称修改为 “食品安全国家标准 食品中米酵菌酸的测定 ”;———修改了适用范围 ;———修改了试样制备 ,增加了固相萃取 ;———增加了高效液相色谱条件 ;———增加了附录 A;———规定了方法检出限和定量限 ;———删除了薄层色谱法 ⅠGB5009.189—2016食品安全国家标准食品中米酵菌酸的测定范围12本标准规定了银耳及其制品 酵米面及其制品等食品中米酵菌酸的测定方法本标准适用于银耳及其制品 酵米面及其制品等食品中米酵菌酸的测定原理试样经提取净化浓缩及过滤后 ,经高效液相色谱仪分析 ,外标法定量试剂和材料3除非另有说明 ,本方法所用试剂均为分析纯 ,水为GBT6682/ 规定的一级水试剂3.1甲醇():色谱纯CHOH33.1.13.1.23.1.33.1.43.1.53.1.6冰乙酸()CHCOOH3氨水(·)NH HO32甲酸( )CHO2 2盐酸(HCl)磷酸( )HPO343.1.7碳酸氢钠(NaHCO3)石油醚(CH O):沸程30℃~60℃3.1.83.1.93.1.105 122无水乙醚()CH O4 10三氯甲烷(CHCl3)试剂配制3.2磷酸溶液(45.4%):量取45.4mL磷酸于100mL容量瓶中,用水稀释定容至刻度 3.2.13.2.2碳酸氢钠溶液(40gL/):称取40g碳酸氢钠加水溶解 ,转移至1000mL容量瓶中定容至刻度3.2.3盐酸溶液(6molL/):量取50mL盐酸于100mL容量瓶中,用水稀释定容至刻度3.2.4甲醇-氨水溶液:量取80mL甲醇,加入1.0mL氨水,加水定容到 100mL,混匀3.2.5甲酸-甲醇溶液(2%):吸取2.0mL甲酸于100mL容量瓶中,用甲醇稀释定容至刻度材料3.3固相萃取柱:阴离子交换柱(60mg3mL/)或等效品,临用前依次加5.0mL甲醇和5.0mL水活化,保持柱体湿润 1GB5009.189—2016标准品3.4米酵菌酸(C28H38O7,CAS号:11076-19-0):纯度≥95%,或经国家认证并授予标准物质证书的标准物质标准溶液配制3.5米酵菌酸标准储备液 (0.1mgmL/ ):准确称取米酵菌酸标准品1mg(精确至0.01mg), 用甲醇3.5.1溶解,转移至10mL容量瓶中,用甲醇定容至刻度置于2℃~8℃冰箱中避光保存, 有效期为6个月米酵菌酸标准系列工作液 :分别吸取米酵菌酸标准储备液用甲醇稀释定容 ,配制成米酵菌酸浓度分3.5.2别为 / // // / / /的0.3gmL0.5gmL1.0gmL2.0gmL5.0gmL10.0gmL20.0gmL40.0gmLμμμμμμμμ标准工作溶液 临用时配制仪器和设备4高效液相色谱仪 ,带二极管阵列检测器 4.14.2天平:感量分别为0.01g和0.01mg固相萃取装置 超声波振荡器 旋转蒸发仪氮吹仪4.34.44.54.64.7微孔有机滤膜(孔径0.45μm)涡旋振荡器4.84.9恒温水浴锅分析步骤试样制备55.1固相萃取法提取5.1.15.1.1.1干试样经粉碎过?0.425mm筛后,称取20g(精确至0.01g)置于锥形瓶中,加入100mL甲醇-氨水溶液;鲜(湿)试样经剪碎匀浆后称取 10g(精确至0.01g),加入80mL甲醇-氨水溶液混匀,室温下避光浸泡1h,置于超声波振荡器中超声提取约30min,过滤干试样取滤液 50mL,鲜(湿)试样取滤液40mL置80℃水浴中浓缩至约 3mL,待净化净化5.1.1.2将浓缩后的试样全部转移到已活化的固相萃取柱中,依次用5mL水和5mL甲醇淋洗,弃去流出