中华人民共和国国家标准GB5009.128—2016食品安全国家标准食品中胆固醇的测定2016-12-23发布2017-06-23实施中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会国家食品药品监督管理总局发布GB5009.128—2016前言本标准代替 /GBT5009.128—2003《食品中胆固醇的测定 》 /— 《食品中胆固醇的GBT22220 2008测定GBT9695.24—2008《肉与肉制品 胆固醇含量测定 》高效液相色谱法 》和/GBT5009.128—2003相比,主要变化如下 :本标准与 /———标准名称修改为 “食品安全国家标准食品中胆固醇的测定”;———增加了气相色谱法作为第一法 ,高效液相色谱法作为第二法;比色法改为第三法 ;GBT9695.24—2008气相色谱法的前处理方法中提取溶剂无水乙醇的添加量和定———修改了 /容体积ⅠGB5009.128—2016食品安全国家标准食品中胆固醇的测定范围1本标准规定了食品中胆固醇的测定方法本标准适用于食品中胆固醇的测定 ,第一法气相色谱法适用于肉及肉制品蛋及蛋制品 乳及乳制品等各类动物性食品以及植物油脂中胆固醇的测定;第二法高效液相色谱法适用于肉及肉制品蛋及蛋制品乳及乳制品等各类动物性食品中胆固醇的测定;第三法比色法适用于肉及肉制品蛋及蛋制品等动物性食品中胆固醇的测定 第一法气相色谱法原理2样品经无水乙醇-氢氧化钾溶液皂化 ,石油醚和无水乙醚混合提取 ,提取液浓缩至干 ,无水乙醇溶解定容后,采用气相色谱法检测 ,外标法定量试剂和材料3除非另有说明 ,本方法所用试剂均为分析纯 ,水为GBT6682/ 规定的一级水试剂3.1甲醇():色谱纯CHOH33.1.13.1.2无水乙醇()CHOH2 53.1.3石油醚:沸程30℃~60℃无水乙醚()CH O3.1.43.1.53.1.64 10无水硫酸钠()NaSO24氢氧化钾(KOH)试剂配制3.23.2.1 60%氢氧化钾溶液 :称取60g氢氧化钾,缓慢加水溶解 ,并定容至100mL石油醚-无水乙醚混合液 (1+1,体积比):将石油醚和无水乙醚等体积混合均匀3.2.2标准品3.3胆固醇标准品(CH OCAS号:57-88-5):纯度≥99%,27 46标准溶液配制3.4/)3.4.1胆固醇标准储备液(1.0mg mL称取胆固醇标准品 0.05g(精确至0.1mg),用无水乙醇溶解并定容至 50mL,放置0℃~4℃密封1GB5009.128—2016可贮藏半年胆固醇标准系列工作液3.4.21.0mgmL25L50L100L500L2000L,用无水乙醇定容至,分别吸取标准储备液 (/ ) μμ μμ10mLμ该标准系列工作液的浓度分别为/ // / / 现用现配2.5gmL5 gmL10gmL50gmL200gmLμμμμμ仪器和设备4气相色谱仪:配有氢火焰离子化检测器(FID)4.14.2电子天平:感量为1mg和0.1mg匀浆机4.34.4皂化装置分析步骤试样制备55.1肉及肉制品等各类固体试样5.1.1取样品的可食部分 200g进行均质将试样装入密封的容器里,防止变质和成分变化 试样应在均质化24h内尽快分析植物油脂乳品等液体试样5.1.2取混匀后的均匀液体试样装入密封容器里待测样品处理5.2皂化5.2.1称取制备后的样品 0.25g~10g(准确至0.001g,胆固醇含量约为 0.5mg~5mg),于250mL圆底烧瓶中,加入30mL无水乙醇,10mL60%氢氧化钾溶液,混匀将试样在100℃磁力搅拌加热电热套皂化回流1h,不时振荡防止试样黏附在瓶壁上,皂化结束后,用5mL无水乙醇自冷凝管顶端冲洗其内部,取下圆底烧瓶 ,用流水冷却至室温 提取5.2.2定量转移全部皂化液于 250mL分液漏斗中,用30mL水分2次~3次冲洗圆底烧瓶,洗液并入分石油醚无水乙醚混合液 (1+1,体积比)分液漏斗,再用40mL -2次~3次冲洗圆底烧瓶并入分液漏斗,振摇2min,静置,分层转移水相,合并三次有机相,用水每次100mL