中华人民共和国国家标准GB5009.111—2016食品安全国家标准食品中脱氧雪腐镰刀菌烯醇及其乙酰化衍生物的测定2016-12-23发布2017-06-23实施中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会国家食品药品监督管理总局发布GB5009.111—2016前言GBT5009.111—2003《谷物及其制品中脱氧雪腐镰刀菌烯醇的测定》 /本标准代替 /GBT23503—2009《食品中脱氧雪腐镰刀菌烯醇的测定免疫亲和层析净化高效液相色谱法》SN/T1571—2005《进出口粮谷中呕吐毒素检验方法 液相色谱法》GBT5009.111—2003相比,主要变化如下 :本标准与/———标准名称修改为 “食品安全国家标准食品中脱氧雪腐镰刀菌烯醇及其乙酰化衍生物的测定”;———增加了方法的适用范围 ;———增加了食品中脱氧雪腐镰刀菌烯醇乙酰化衍生物的测定;———增加了同位素稀释液相色谱 -串联质谱法;———增加了固相萃取柱净化的前处理方式;———增加了免疫亲和柱净化 -高效液相色谱法 ;———增加了商业化免疫亲和柱评价技术参数要求ⅠGB5009.111—2016食品安全国家标准食品中脱氧雪腐镰刀菌烯醇及其乙酰化衍生物的测定范围1本标准规定了食品中脱氧雪腐镰刀菌烯醇及其乙酰化衍生物的测定方法 第一法为同位素稀释液相色谱 -串联质谱法,适用于谷物及其制品 酒类酱油醋酱及酱制品中脱氧雪腐镰刀菌烯醇 3-乙酰脱氧雪腐镰刀菌烯醇和 15-乙酰脱氧雪腐镰刀菌烯醇的测定 第二法为免疫亲和层析净化高效液相色谱法,适用于谷物及其制品酒类酱油醋酱及酱制品中脱氧雪腐镰刀菌烯醇的测定 第三法为薄层色谱测定法 ,第四法为酶联免疫吸附筛查法 ,适用于谷物及其制品中脱氧雪腐镰刀菌烯醇的测定第一法同位素稀释液相色谱-串联质谱法原理2试样中的脱氧雪腐镰刀菌烯醇 3-乙酰脱氧雪腐镰刀菌烯醇和 15-乙酰脱氧雪腐镰刀菌烯醇用水和乙腈的混合溶液提取 ,提取上清液经固相萃取柱或免疫亲和柱净化,浓缩定容和过滤后 ,超高压液相色谱分离,串联质谱检测 ,同位素内标法定量 试剂和材料3除非另有说明 ,本方法所用试剂均为分析纯 ,水为GBT6682/ 规定的一级水试剂3.1乙腈( ):色谱纯3.1.13.1.23.1.33.1.4CHCN3甲醇():色谱纯CHOH3正己烷( )CH6 14氨水(·)NH HO323.1.5甲酸(HCOOH)3.1.6氮气(N2):纯度≥99.9%试剂配制3.23.2.1乙腈-水溶液(84+16):量取160mL水加入到840mL乙腈中,混匀乙腈饱和的正己烷溶液 :量取200mL正己烷于250mL分液漏斗中,加入少量乙腈, 剧烈振摇3.2.2数分钟,静置分层,弃去下层乙腈层即得1GB5009.111—20163.2.3甲醇-水溶液(5+95):量取5mL甲醇加入到95mL水中,混匀3.2.4 0.01%氨水溶液:取100μL氨水加入到1000mL水中,混匀(仅供离子源模式为ESI-时使用)3.2.5 0.1%甲酸溶液:取1mL甲酸加入到1000mL水中,混匀(仅供离子源模式为ESI+时使用)标准品3.3DONCH O CAS 51481-10-8):纯度≥99%,或经国家认证并授予脱氧雪腐镰刀菌烯醇 (,,号:3.3.115 206标准物质证书的标准物质 3-ADONC17H22O6,CAS号:50722-38-8):纯度≥99%, 或经国家3.3.2 3-乙酰脱氧雪腐镰刀菌烯醇( ,认证并授予标准物质证书的标准物质3.3.3 15-乙酰脱氧雪腐镰刀菌烯醇(15-ADON,C17H22O6,CAS号:88337-96-6):纯度≥99%, 或经国家认证并授予标准物质证书的标准物质13C-脱氧雪腐镰刀菌烯醇同位素标准溶液(1513C-DON,13CH O 25gmL≥99%):/ ,纯度3.3.43.3.5μ15 20613C-3- -乙酰脱氧雪腐镰刀菌烯醇同位素标准溶液(13C-3-ADON,13C H O 25gmL):/ ,纯度17μ17 226≥99%标准溶液配制3.43.4.1DON3-ADON和15-ADON1mg(准确至0.01mg),分标准储备溶液( / ):分别称取