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SNT_2497_14-2010进出口危险化学品安全试验方法第14部分:SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳试验PDF

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文本描述
中 华 人 民 共 和 国 出 入 境 检 验 检 疫 行 业 标 准犛犖/犜2497 .14 —2010进 出 口 危 险 化 学 品 安 全 试 验 方 法第 14 部 分 :犛犇犛聚丙 烯 酰 胺凝 胶 电 泳 试 验犜犲狊狋 犿犲狋犺狅犱 狅犳犻犿狆狅狉狋犪狀犱犲狓狆狅狉狋 犱犪狀犵犲狉狅狌狊 犮犺犲犿犻犮犪犾狊—犘犪狉狋14 :犇犲狋犲狉犿犻狀犪狋犻狅狀狅犳狊狅犱犻狌犿 犱狅犱犲犮狔犾狊狌犾犳犪狋犲 狆狅犾狔犪犮狉狔犾犪犿犻犱犲犵犲犾犲犾犲犮狋狉狅狆犺犲狉犲狊犻狊20100302 发 布20100916 实 施中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局发布 犛犖/犜2497 .14 —2010前    言    SN/T2497 《进 出 口 危 险 化 学 品 安 全 试 验 方 法 》系 列 标 准 共 分 为 29 部 分 :——— 第 1 部 分 :体 内 哺 乳 动 物 肝 细 胞程 序 外——— 第 2 部 分 :空 斑 形 成 细 胞 (PFC)试 验;——— 第 3 部 分 :大 型 溞 繁 殖 试 验;合 成 (UDS)试 验;DN A——— 第 4 部 分 :酿 酒 酵 母 有 丝 分 裂 重组 试 验;——— 第 5 部 分 :睾 丸 细 胞 (UDS)试 验;——— 第 6 部 分 :哺 乳 类 动 物 细 胞 姐 妹染 色 单 体 互 换 体 外 试 验;——— 第 7 部 分 :小 鼠 耳 肿 胀 试 验;——— 第 8 部 分 :腘 窝 淋 巴 结 试 验;——— 第 9 部 分 :血 清 溶 血 素 测 定 试 验 ;——— 第 10 部 分 :T 淋 巴细 胞 增 殖 功 能 测 定 试 验;——— 第 11 部 分 :种 系 突 变 试 验 ;——— 第 12 部 分 :单 细 胞 凝 胶 电泳 分 析 试 验;——— 第 13 部 分 :荧 光 原 位 杂 交试 验;——— 第 14 部 分 :SDS聚丙 烯 酰胺 凝 胶 电 泳 试 验;——— 第 15 部 分 :PCRSSCP 实 验;——— 第 16 部 分 :WesternBlot实 验;——— 第 17 部 分 :哺 乳 动 物 行 为毒 理 学 试 验;——— 第 18 部 分 :DN A加 合 物 的 检 测 方 法;——— 第 19 部 分 :NorthernBlot 实 验;——— 第 20 部 分 :Bradford法 测 定 蛋 白 质 含 量;——— 第 21 部 分 :琼 脂 糖 凝 胶 电泳 试 验;——— 第 22 部 分 :DN A的值 测 定 方 法;Tm——— 第 23 部 分 :细 胞 器 的 分 离实 验 方 法;——— 第 24 部 分 :细 胞 免 疫 功 能体 外 检 测 方 法;——— 第 25 部 分 :体 液 免 疫 功 能试 验;——— 第 26 部 分 :巨 噬 细 胞 功 能试 验;——— 第 27 部 分 :流 式 细 胞 术 检测 凋 亡;——— 第 28 部 分 :穿 梭 质 粒 在 突变 检 验 中 的 应 用;——— 第 29 部 分 :生 化 需 氧 量 (BOD)测 定。本 部 分 为 SN/T2497 系 列标 准 的 第 14 部 分。本 部 分 由 国 家 认 证 认 可 监 督 管 理 委 员 会 提 出并 归 口。本 部 分 负 责 起 草 单 位 :中 华 人 民 共 和 国 天津 出 入 境 检 验 检 疫 局 、中 华 人 民 共 和 国 湖 南 出 入 境 检 验 检疫 局。本 部 分 主 要 起 草 人 :张 园 、王 利 兵 、赵琢 、王 华 、李 学 洋 、徐 斌。本 部 分 系 首 次 发 布 的 出 入 境 检 验 检 疫 行 业 标准。Ⅰ 犛犖/犜2497 .14 —2010进 出 口 危 险 化 学 品 安 全 试 验 方 法第 14 部 分 :犛犇犛聚丙 烯 酰 胺凝 胶 电 泳 试 验1 范 围SN/T2497 的 本 部 分 规 定 了 进 出口 危 险 化 学 品 安 全 试 验 中 SDS聚丙 烯酰 胺 凝 胶 电 泳 试 验 的 主 要试 剂 、试 验 步 骤 和 试 验 结 果。本 部 分 适 用 于 进 出 口 危 险 化 学 品 SDS聚 丙 烯 酰 胺 凝 胶 电 泳 试 验。2 原 理SDS聚丙 烯 酰 胺 凝 胶 电 泳(Sodium DodecylSulfate Polyacrylamide Gel Electropheresis),在聚丙烯 酰 胺 凝 胶 系 统 中 ,加 入 一 定 量 的 十 二烷 基 硫 酸 钠 (SDS),蛋 白 质 样 品 就 会 与 SDS结 合 形成 带 负 电 荷的 复 合 物 ,由 于 蛋 白 质 的 相 对 分 子 质 量 不同 ,所 形 成 复 合 物 的 相 对 分 子 质 量 也不 同 ,在 电 泳 中 反 映 出 不同 的 迁 移 率 。 根 据 标 准 蛋 白 质 样 品 在 电 泳 中 的 迁移 率 和 相 对 分 子 质 量 所 作 出 的 标 准 曲 线 就 可 以 推 算 出蛋 白 质 样 品 相 对 分 子 质 量 的 近 似 值。3 主 要 试 剂3.1 30% 丙 烯 酰 胺取 丙 烯 酰 胺 29 g 和 1 g N ,N ’亚 甲 双 丙 烯 酰 胺 溶 于 60 mL水 中 ,加 热 至 37 ℃ 溶 解 ,补加 水 至 终 体积 为 100 mL ,过滤 除 菌 ,避 光 ,4 ℃ 保 存。3.2 1 犿狅犾/犔 犜狉犻狊 溶 液 (狆犎6.8)称 取 12 .1 g Tris 碱 加 水 至 接 近 100 mL,用 0.1mol/L 的HCl 调pH 值至 6.8,补水 至 100mL,