固雪中华人民共和国国家标准?? ??????? ?????—??丰瞀髁鬻瓣警麟赞星发布中国国家标准化管理委员会“”。 死试验》????⑽陌?。本标准由全国危险化学品管理标准化技术委员会??／???提出并归口。本标准负责起草单位：中国疾病预防控制中心职业卫生与中毒控制所。 化学品啮齿类动物显性致死试验方法本标准规定了啮齿类动物显性致死试验的试验目的、术语和定义、试验基本原则、试验程序、结果评价、试验报告和结果解释。下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单?话?n?蔽蟮哪谌?或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。显性致死?????? ???指引起胚胎或胎儿死亡。当接触某一化学物产生的这种作用表明受试样品作用于实验动物的生殖显性致死突变???????????指发育中的精子或卵子在物理或化学因素作用下，发生了染色体损伤，从而使受精卵在发育中造成死亡。并不引起受精障碍，但引起受精卵的死亡。本试验是一项生殖细胞致突变试验，用来检测整体啮齿类动物生殖缅胞染色体畸变，迸一步确证体外试验，或其他试验系统获得的阳性结果，以评价受试样品能否到达性腺组织产生遗传危害。通过适当的途径使雄性动物接触受试样品，然后与未经染毒且未交配过的雌性动物交配，交配结束受试样品应新鲜配制。除非有资料表明此溶液?蛉樽且骸⑿?且旱?保存具有稳定性。固体受试 样品应溶于或悬浮于适当的溶剂或载体中，并进行稀释。液体受试样品可直接使用或稀释后使用。根据受试样品的理化性质??苄裕??苄?确定受试样品所用的溶剂或载体。但所用溶剂或载体在使用剂量水平对实验动物应不产生毒作用，且不与受试样品发生任何化学反应。通常用蒸馏水、等渗盐水、植物油、食用淀粉、羧甲基纤维素钠等。如非常用溶剂或载体，应有参考资料说明其成分。??对照每次试验都应设置相应的阳性对照和阴性对照?芗粱蛟靥?，阴性对照除不使用受试样品外，其他处理与受试样品组一致。?环磷酰胺?????????珻? ?．?—?一?，??／??逯?腹腔注射；??????珻??．??—?—?，??／??逯?～?／??逯?腹腔注射；?．?—?—?，???／??逯?腹腔注射；应选用低背景的显性致死率、高妊娠率和高植人数、健康、性成熟的动物品系，大鼠和小鼠是本试验的常规使用动物。经生殖能力预试，受孕率应在?％以上。小鼠体重??陨匣虼笫筇逯??应随机分组，每个处理组和对照组雄鼠一般不少于?只，要求每组每周至少有?只受孕雌鼠。动物购可观察到的毒性效应，低剂量应不出现任何毒效应。剂量组的剂量间距以??倍为宜。对照组除不接触受试样品外，其他条件应与染毒组完全相同。必要时可设赋形剂对照组，以研究赋形剂的影响。对照组中赋形剂的浓度可采用高浓度组的赋形剂用量。如染毒后出现严重的中毒症状，则应降低受试样品的剂量，即使高剂量组由于浓度的降低导致了其他毒性反应明显下降或消失，也应如此。??．?苁匝?范拘越系褪保?罡呒亮恳淮稳径疚??痥?体重??罡呒亮慷啻稳径疚????·?。??试验步骤??．??雄鼠预先接触受试样品，再进行交配。雌鼠不接触受试样品。??．??根据试验目的或受试样品的性质选择染毒途径，通常采取经口灌胃或腹腔注射的途径。 雄鼠接触受试样品后的当天?径疽淮?或最后一次接触受试样品后的当天?啻稳径?，按??或?笕〕龃剖罅硇兴茄?Ｐ凼笤蛴?交配的雌鼠同笼交配，如此共进行??批。以雌雄鼠同笼日算起第?日～第?日，采用颈椎脱臼法处死雌鼠，立即剖腹取出子宫，仔细检查、计数，分别记录每一雌鼠的植人数、活胎数、早期死亡胚胎数和晚期死亡胚胎数。??．??活胎：完整成形、色鲜红，有自然运动，机械刺激后有运动反应。??．??早期死亡胚胎：胚胎形体较小，外形不完整，胎盘较小或不明显。最早期死亡胚胎会在子宫内膜上隆起如一小瘤。如已完全被吸收，仅在子宫内膜上留一隆起暗褐色点状物。??．??晚期死亡胚胎：成形、色泽暗淡，无自然运动，机械刺激后无运动反应。?瓽结果处理与评价况。对每只雌鼠而言，还应详细记录其交配周次、与之交配的雄鼠接触受试样品的剂量以及活胎率和死胎率情况。?????????平均早期胚胎死亡数一生墨羞袭孽糌和检验法进行统计学分析。受试样品组受孕率或着床数明显低于阴性对照组；早期或晚期胚胎死亡率明显高于阴性对照组，并有明显的剂量一反应关系和统计学意义时，即可确认为阳性结果。若统计学上差异有显著性，但无剂量一反应关系，则须进行重复试验，结果能重复者可确定为阳性。显性致死阳性结果表明在试验条件下受试样品对所用动物的生殖细胞的具有遗传毒性。??受试样品名称、理化性状、配制方法、所用浓度等。??实验动物的种属、品系和来源?⒚骱细裰ず藕投?锛侗?、性别、体重范围和??周龄、喂养方式；实验动物饲养环境，包括饲料来源?苑潜曜妓橇嫌ψ⒚魉橇系呐浞?、室温、相对湿度，动物实验室和饲料的合格证号；剂量设计和动物分组方法，每组所用动物性别、数量及初始体重范围。??各项检测指标的测定方法及主要检测仪器的名称和型号。