中华人民共和国国家标准食用豆粕卫生标准的分析方法GB/T 14932.2-94Method for determination of hygienic standard of edible soybean meal━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━1主题内容与适用范围本标准规定了食用豆粕卫生标准的测定方法。本标准适用于大豆经溶剂萃取食用豆油后，以其作为食品工业原料的豆粕各项卫生指标的测定。2引用标准GB 5009.3食品中水分的测定方法GB 5009.4食品中灰分的测定方法GB 5009.5食品中蛋白质的测定方法GB 5009.11食品中总砷的测定方法GB 5009.12食品中铅的测定方法GB 5009.37食用植物油卫生标准的分析方法3感官检查应为黄色或棕黄色片粒状，具有豆粕固有的色泽和气味，无霉变、虫迹、无杂屑、油污等。4理化检验4.1水分的测定方法按 GB 5009.3执行。4.2灰分的测定方法按 GB 5009.4执行。4.3粗蛋白质的测定方法按 GB 5009.5执行。4.4砷的测定方法按 GB 5009.11执行。4.5铅的测定方法按 GB 5009.12执行。5脲酶活性5.1pH增值法5.1.1原理豆粕中的脲酶可以使尿素分解产生氨，使体系中 pH值增大。用pH计或酸碱指示剂测定其 pH变化,以判断脲酶活性。5.1.2试剂5.1.2.1尿素 GB 696，分析纯。5.1.2.20.05 mol/L磷酸氢二钾溶液：称取5.0706g磷酸氢二钾(K2HPO4·3H2O)，加新煮沸过的蒸馏水溶解，冷却后转移至 500 mL容量瓶中，定容至刻度。5.1.2.30.05 mol/L磷酸二氢钾溶液：称取3.40g磷酸二氢钾(KH2PO4),加入新煮沸的蒸馏水溶解，冷却后转移至 500 mL容量瓶中，定容至刻度。5.1.2.4磷酸缓冲液(pH7.0)：取 61.1mL磷酸氢二钾溶液(5.1.2.2)与38.9mL磷酸二氢钾溶液(5.1.2.3)混合，当试剂纯粹时，用此法配制。否则应稍微变更两种溶液的比例，使混合溶液 pH值为7.0。此溶液可保存三个月。5.1.3仪器5.1.3.1pH计:灵敏度应达到0.02pH单位。并带有与其配套使用的甘汞电极和玻璃电极。5.1.3.2恒温水浴箱：温度 30±5℃。 5.1.4操作方法称取经粉碎(约 40目，且样品粉碎过程中应避免发热)的样品10.0g。置于带塞的锥形烧瓶中，加水 100.0mL，振摇 30min，过滤样液备用(宜当天测定)。吸取2.0mL样液，置于带塞比色管中。加 pH缓冲液(5.1.2.4)8mL，加 0.2g尿素。摇匀1min，放置在 30±5℃水浴中保温 30 min，同时作样液空白，即 2.0mL样液，加8.0mL缓冲液。在水浴中同时保温。管内容物经冷却后，测定 PH值。5.1.5计算，见式(1)：X1＝pH1—pH0 ......................................... (1)式中：X1——脲酶活性指数;pH1——样液对尿素分解后 pH值；pH0——样液空白管 pH值。5.2简易判定法5.2.1原理同 5.1.1。5.2.2试剂5.2.2.1尿素：GB 696，分析纯。5.2.2.2酚红指示剂：称取 0.1g酚红，加1.43 mL 0.1mol/L氢氧化钠溶液，在研钵中研磨以促溶解，然后转移至 250 mL容量瓶中，加水至刻度，摇匀备用。5.2.3操作方法取 0.2g粉末样品(避免粉碎时发热)，置于25 mL，比色管中加 0.02g尿素,加酚红指示剂 2滴，再加水20mL，充分摇匀 15s，记录粉红色出现时间，并根据时间判断尿酶活性，颜色出现时间应少于 15min。颜色出现时间1min脲酶活性极强强1～5min5～15min稍有无15min同时作空白对照试验样品空白(不加尿素)及试剂空白(不加样品)，只有上述空白正常时，即酚红指示剂不改变颜色，试验结果才是可靠的。6溶剂残留6.1原理:同 GB 5009.37。6.2试剂:同 GB 5009.37。5.3仪器:同 GB 5009.37。6.4操作方法6.4.1标准曲线制作取输液瓶，以 1μg微量进样器沿瓶壁注入0.5μg六号溶剂，迅速塞上橡胶反口塞，铝盖封口后，在 80±2℃烘箱中，加热 2h，取出冷却至室温，用100 μg，微量进样器,按 20,40,60,80,100μl取顶空气分别注入色谱仪,以其色谱峰高为纵轴，以对应的样品溶剂含量为横轴，制作标准曲线，在完全按本法制作标准曲线时，呈下对应关系：━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━标准顶空气进样量(μl)20406080100 对应的样品中溶剂含量(X2,ppm)3570105140175━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━其中 X2，由式(2)计算得出:DV1━━━×V2VX2＝━━━━━━×1000 .................................. (2)m━━×V3V式中：X2——样品中溶剂残留量，mg/kg;V1——6号溶剂取用时，μg；D——6号溶剂的相对密度,0.7mg/μg;V2——标准顶空气进样量，μg；V3——样品顶空气进样量，μg，V——输液瓶容积，mL；m——样品质量，g。6.4.2样品测定取 100 mL输液瓶，将两张直径稍小于瓶底内径的圆形滤纸，置于瓶内，向滤纸上加注0.5ml水，使滤纸附贴于瓶底，称取2.00 g豆粕，置于瓶内滤纸上，立即塞好橡胶反口塞,铝盖封口,然后在 80±2℃烘箱内加热 2h，样品瓶经加热气化后，冷却至室温，用微量进样器取 100 μl顶空气，进行色谱分析，由所得样品色谱峰高，从标准曲线上可直接查得样品中溶剂含量(ppm)。━━━━━━━━━━━附加说明:本标准由卫生部卫生监督司提出。本标准由上海市食品卫生监督检验所、吉林省食品卫生监督检验所、上海市南市区卫生防疫站负责起草。本标准主要起草人沈文、成凯泰、沈