?园宜中华人民共和国国家标准实验动物 兔出血症病毒检测方法??????????????????—??丰瞀嬲紫瓣訾糌瞥星发布中国国家标准化管理委员会仪? ?增加兔出血症病毒核酸???核酸检测方法；确定兔免疫接种??疫苗后的血清抗体合格判定标准。本部分由全国实验动物标准化委员会提出并归口。本部分起草单位：全国实验动物标准化技术委员会。本部分主要起草人：贺争鸣、付瑞、田克恭。 实验动物兔出血症病毒检测方法件，其随后所有的修改单?话?n?蔽蟮哪谌?或修订版均不适用于本部分，然而，鼓励根据本部分达协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本特性检测兔肝组织中有无??抗原。血凝抑制试验???涸谝欢ㄌ跫?拢琑????恕皁”型红细胞的能力可被特异性抗体所抑制。根据这一特性检测兔血清中有无??抗体。核酸检测：根据????基因序列保守的特点，设计特异引物，扩增目的片段，检测兔组织中的??核酸。?痬?离心???抗原免疫或??自然感染恢复后的兔血清。??．????．?? ??氨苄青霉素?????????????痯?。?????????????．????．??可用于连接???锏纳唐坊疶载体。??．??质粒小量提取试剂盒。??器材??．?⒘考友??容量?? ?～? ??．?恒温培养箱。??．?恒温摇床。??．?恒温水浴箱。??．?超纯水系统。??．?冰箱。位置??籄???????、??’?，置于灭菌玻璃研磨器中，加???．??将肝组织匀浆转移至????．??加???三氯甲烷，充分混匀????℃???．??取上清，加等体积异丙醇，室温????℃?警告：??对眼睛和气道粘膜有强刺激，在操作中应在通风条件下进行，使用时戴口罩，不小心沾到手上应立即冲洗。?????随机引物???????痯?。?????? ???．??反转录反应条件为：?℃??????????胏??捎米鱌?反应模板。??．??每次进行?时均设标准阳性、阴性及空白对照。??????／?，??，???????????????