DB36备案号：18618-2006江西省地方标准DB36/T 483—2005饲料中硒的测定-氢化物原子荧光法 2005-12-25发布2006-02-01实施江西省质量技术监督局 发布 DB36/T 483—2005前言本标准由江西省农业厅提出。本标准由江西省兽药饲料监察所负责起草。本标准起草人：尹腾桂、饶辉、符金华、周华娇、文虹、周伟良。I DB36/T 483—2005饲料中硒的测定-氢化物原子荧光法1范围本标准规定了氢化物发生原子荧光法测定饲料中硒的方法。本标准适应于配合饲料、浓缩饲料、添加剂预混合饲料和单一饲料中硒的测定。最低检出限为0.3ng/ml，曲线线形范围0～400ng/mL（以Se计）。2方法原理样品经加酸加热消化后，使样品中的硒完全转化为四价硒。用硼氢化钾（KHB4）作还原剂，将四价硒在盐酸介质中还原成硒化氢（SeH2），由载气（氩气）带入原子化器进行原子化，在硒特别空心阴极灯照射下，基态硒原子被激发至高能态，在去活化回到基态时，发射出特征波长的荧光，其荧光强度与硒含量成正比，与标准系列比较定量。3试剂本方法中，除特殊规定外，所用试剂为分析纯，实验用水为蒸馏水或同等纯度的水。3.1硝酸（优级纯）3.2高氯酸（优级纯）3.3盐酸（优级纯）3.4混合酸：硝酸+高氯酸（4+1）混合酸3.5氢氧化钾（优级纯）3.65%硼氢化钾溶液：称取1.5g硼氢化钾（KBH4）溶于100mL 氢氧化钾溶液（0.5%）中。3.7王水：盐酸+硝酸+水（15+5+20）混合酸溶液。3.8铁氰化钾（100g/L）：称取10.0g铁氰化钾[K3Fe(CN)6]溶于蒸馏水中，并定容至100mL，混匀。3.9硒标准贮备液：精确称取100.0mg硒（光谱纯），溶于少量硝酸中，加2mL高氯酸，置沸水浴中加热3h～4h，冷却后再加8.4mL l盐酸，再至沸水浴中煮2min，准确稀释至1000mL，其盐酸浓度为0.1mol/L，此贮备液浓度为每毫升相当于100ug硒。3.10硒标准应用液：100ug/ mL硒标准贮备液1.0mL，定容至100mL，此应用液浓度为1ug/ mL。4仪器设备4.1无色散原子荧光光谱仪。4.2电热板。4.3蒸煮锅。4.4高筒烧杯（150 mL）。4.525 mL具塞试管。4.6其它试验室常用仪器设备5操作方法5.1样品的处理和消化5.1.1配合饲料、浓缩饲料及有机单一饲料的处理和消化样品用不锈钢磨粉碎，储于塑料瓶内，备用。1 DB36/T 483—2005称取1克左右样品（精确至0.0001g）于150 mL高筒烧杯内，加入10.0 mL混合酸及几粒玻璃珠，盖上表面皿冷消化过夜。次日于电热板上加热，并及时补加混酸。当溶液变为清亮无色并有白烟时，再继续加热至剩余体积7mL左右，切不可蒸干。冷却，再加5mL(6mol/L)盐酸，继续加热至溶液变为清亮无色并伴有白烟出现。冷却转移至100 mL容量瓶中，加入10 mL盐酸（3.3）、4 mL铁氰化钾（3.8），并定容，待测。同时做空白试验。5.1.2矿物质预混合饲料及无机单一饲料的处理和消化称取0.5-1g（精确0.0001g）试样置于25mL的具塞试管中，然后加入10mL王水，静置30nin后置于蒸锅中蒸煮2-3小时。冷却后转移至100 mL的容量瓶中，定容摇匀。然后再取出1 mL置于50 mL的容量瓶中，加入10mL盐酸（3.3），4 mL铁氰化钾（3.8），定容待测。同时做空白试验。5.2标准曲线配制分别取0.0、0.1、0.2、0.4、0.8 mL标准应用液于100 mL容量瓶中，加入4 mL铁氰化钾，用20%的盐酸溶液定容至刻度，制成标准工作曲线。5.3测定5.3.1仪器参考条件负高压：280V；灯电流：60mA；原子化温度：室温（点火）；炉高：7mm；载气流量800 mL /min；测量方式：标准曲线法；工作曲线方程：线性；信号类型：峰面积；延迟时间：1S；读数时间：16～18S；注入时间18～20S；进样体积：1 mL。设定好仪器最佳条件，在样品参数画面输入以下参数：样品质量（g或mL），稀释体积（mL），并选择结果的浓度单位。逐步将炉温升至所需室温后，稳定10-20min后开始测量。连续测定载流空白，待读数稳定后，转入标准系列测量，绘制标准曲线。在转入样品测定之前，先进入空白值测量状态，用样品空白消化液进样，让仪器取其均值作为扣底的空白值，随后即可依次测定样品。测定完毕后，选择“打印报告”即可将结果自动打印。6分析结果计算和表述(C-C0)×V×1000X=m×1000×1000式中：X——样品中硒的含量，mg/㎏（或mg/L）；C——样品消化液中测定浓度，ng/ mL；C0——样品空白消化液中测定浓度，ng/ mL；m——样品质量（体积）g（mL）；V——样品消化液总体积，mL。7允许误差室内每个样品应称两份试料进行测定，以其算术平均值为分析结果，其间分析结果的相对偏差应不大于下表所列允许差。硒含量 mg/kg(或mg/L)≤0.100允许偏差%40302015＞0.100-0.200＞0.200-0.400＞0.4002