ICS65.020DB32B32备案号：37046-2013江 苏省地方 标 准DB32/T 2269-2012棉籽油份含量无损测定 近红外光谱检测法 Determination of Cottonseed Oil Content by Near Infrared Spectroscopy2012-12-28发布 2013-02-28实施发布江苏省质量技术监督局 DB32/T 2269-2012前言为建立一套适于育种、快速准确的分析棉籽油份含量的检测方法，特制定本标准。本标准按照GB/T1.1-2000《标准化工作导则 第1部分：标准的结构和编写》的要求编制。本标准由江苏省农业科学院提出。本标准起草单位：江苏省农业科学院经济作物研究所。本标准主要起草人：徐鹏、沈新莲、张香桂、倪万潮、徐英俊。 DB32/T 2269-2012棉籽油份含量无损测定近红外光谱检测法1范围本标准规定了近红外光谱测量棉籽油份含量无损测定的术语和定义、方法和原理、数学模型的创建、样品测定和允许差。本标准适用于棉籽油份育种过程中油份含量无损快速测定，不适用于棉籽油份含量定量分析检测。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T 5512-2008粮油检验，粮食中粗脂肪含量测定3术语和定义下列术语和定义适用于本标准。3.1近红外光谱Near Infrared Spectroscopy光谱区介于780nm～2526nm波段的光谱。3.2棉籽油份含量Cottonseed oil content棉仁中油份含量的百分比。4方法和原理近红外光谱仪适用于对含有C-H、O-H、N-H、S-H化学键的化合物作组分分析。在近红外波长范围内，含有上述化学键的物质会产生吸收。不同波长谐波的组合构成了被测物质在近红外谱带内的特征吸收图谱,具有不同指标的样品在近红外谱带中将产生不同强度的吸收图谱。利用统计学理论、专业软件处理建立被检测样品的数据库或校正曲线，然后可以利用该数据库或校正曲线方便快速的通过未知样品的近红外图谱得知其被测指标的数据。5近红外光谱测定棉籽油份含量数学模型的创建5.1供试材料收集国内外棉花常规种质资源，油份含量分布具有很好的代表性且含量变化范围较宽泛。同年繁种，收获中部成熟铃，每份材料获得1000粒左右种子，用工业硫酸脱绒处理得到光籽，自然晒干后并于37度烘箱处理12小时。5.2标准方法分析取 10g 左右光籽，去壳，磨碎。采用索氏抽提法测量棉籽种仁油份含量，具体方法参照GB/T5512-2008，粮油检验，粮食中粗脂肪含量测定。每个样品三次重复，取三次重复的平均值作为该样品1 DB32/T 2269-2012油份含量的化学测试值。若重复之间测试值存在显著差异（本标准中认为相对误差大于5%则差异显著），则重新测量其化学值。5.3样品处理根据样品标准分析方法化学测试值含量的分布，将样品油份含量的大小按顺序排列后，以3:1的比例分成校正集和验证集。以最大最小值，标准差以及变异系数判定校正集及验证集样品的代表性。5.4光谱数据采集近红外光谱扫描采取重复装样，平均光谱的方法减少光谱误差。每个样品3次重复装样并三次重复扫描得到平均光谱数据。5.5模型的构建采用化学计量学方法通过偏最小二乘法建立近红外光谱测量棉籽油份含量的校正模型，将收集的校正集样品的光谱数据和校正集样品的化学值进行关联，确定两者之间的定量关系。图1为本标准所构建模型中化学值与近红外值之间的相关关系图，决定系数R2为0.9440，校正标准差（SEE）为3.46%。图1 校正集的棉籽油份含量化学测试值与近红外光谱预测值之间的关系Fig.1 RelationshipbetweenchemicalmethodandNIRS predicted valuesofcottonseed oilcontentin modeling set5.6模型质量的验证用本标准中构建的模型测量验证集样品的油份含量，本标准中验证集样品近红外光谱预测值与标准方法化学值的决定系数为0.9228，预测标准差（SEP）为3.55%。表明该模型的预测值与实测值之间的相关性极其显著；同时对两种检测方法结果进行t测验比较，t=0.414远小于t0.05=2.064。结果表明，用近红外测量棉籽油份含量与标准化学分析法之间没有显著性差异，进一步说明本研究所构建的定标模型可信。6样品测定对未知棉籽样品按5.1步骤脱绒处理并烘干后，利用上述构建的模型采用近红外分析仪扫描，可以快速准确得到该未知样品的油份含量。7测定允许差本标准中规定在重复试验条件下，近红外光谱法与标准化学分析方法检测结果相对偏差不得超过5%。2