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版权所有·禁止翻制、电子发售 中 华 人 民 共 和 国 出 入 境 检 验 检 疫 行 业 标 准 犛犖/犜2970 —2011 国 境 口 岸 蚊 类 携 带 西 部 马 脑 炎 病 毒 的 检 测 方 法 犚犜犘犆犚 法 犇犲狋犲犮狋犻狀犵 犿犲狋犺狅犱 犳狅狉 狑犲狊狋犲狉狀 犲狇狌犻狀犲 犲狀犮犲狆犺犪犾犻狋犻狊狏犻狉狌狊犻狀 犿狅狊狇狌犻狋狅犲狊 犪狋犳狉狅狀狋犻犲狉 狆狅狉狋— 犚犜犘犆犚犿犲狋犺狅犱 20110531 发 布 20111201 实 施 中华人民共和国 国家质量监督检验检疫总局 发布 版权所有·禁止翻制、电子发售 中 华 人 民 共 和 国 出 入境 检 验 检 疫 行 业 标 准 国 境 口 岸 蚊 类 携 带 西 部 马 脑 炎 病 毒 的 检 测 方 法 犚犜犘犆犚 法 SN/T2970 — 2011 中 国 标准出 版社 出版 北 京 复 兴 门 外 三 里 河北 街 16号 邮 政 编 码 :100045 网 址 www.spc 电 话 :68523946 68517548 中 国 标 准 出 版 社 秦 皇岛 印 刷 厂 印 刷 开 本880 × 1230 1/16 印 张0.5 字 数 千 字 9 2011 年 11月 第 一 版 2011 年 11 月 第 一 次印 刷 印 数 1—1600 书 号 :155066·222667 定 价14 .00 元 版权所有·禁止翻制、电子发售 犛犖/犜2970 —2011 前 言 本 标 准 按 照 GB/T1.1—2009 给 出 的 规 则 起 草 。 本 标 准 由 国 家 认 证 认 可 监 督 管 理 委 员 会 提 出并 归 口。 本 标 准 起 草 单 位 :中 华 人 民 共 和 国 辽 宁 出入 境 检 验 检 疫 局 、中 国 检 验 检 疫 科学 研 究 院 、中 华 人 民 共 和 国 黑 龙 江 出 入 境 检 验 检 疫 局。 本 标 准 主 要 起 草 人 :宋 锋 林 、耿 丽 梅 、孙时 、张 晓 龙 、孙 明 亮 、吴 刚 、薛 芳 、刘 洪 文 、高 玉 峰 。 Ⅰ 版权所有·禁止翻制、电子发售 犛犖/犜2970 —2011 国 境 口 岸 蚊 类 携 带 西 部 马 脑 炎 病 毒 的 检 测 方 法 犚犜犘犆犚 法 1 范 围 本 标 准 规 定 了 国 境 口 岸 蚊 类 携 带 西 部 马 脑 炎病 毒 的 检 测 对 象 、生 物 安 全 要 求 、样品 的 保 存 运 输 、检 测 方 法 和 结 果 判 断。 本 标 准 适 用 于 国 境 口 岸 蚊 类 携 带 西 部 马 脑 炎病 毒 的 检 测。 2 规 范 性 引 用 文 件 下 列 文 件 对 于 本 文 件 的 应 用 是 必 不 可 少 的 。 凡 是注 日 期 的 引 用 文 件 ,仅 注 日 期的 版 本 适 用 于 本 文 件 。 凡 是 不 注 日 期 的 引 用 文 件 ,其 最 新 版 本 (包括 所 有 的 修 改 单 )适 用 于 本 文 件。 GB 19489 实 验 室 生 物 安 全 通用 要 求 人 间 传 染 的 病 原 微 生 物 名 录 (中 华 人 民 共和 国 卫 生 部 ,2006 年) 3 术 语 和 定 义 下 列 术 语 和 定 义 适 用 于 本 文 件。 3.1 西 部 马 脑 炎 病 毒 狑犲狊狋犲狉狀 犲狇狌犻狀犲犲狀犮犲狆犺犪犾犻狋犻狊狏犻狉狌狊;犠犈犈犞 西 部 马 脑 炎 病 毒 为 披 膜 病 毒 科 甲 病 毒 属 病 毒,具 有 甲 病 毒 的 一 般 形 态 特 征 。 病 毒 粒 子 呈 球 形 对 称, 有 囊 膜 ,直 径 40 nm 。 环 跗 库 蚊 (犆狌犾犲狓 狋犪狉狊犪犾犻狊 )、背 点 伊 蚊 (犃犲犱犲狊 犱狅狉狊犪犾犻狊 )等 蚊虫 为 本 病 毒 的 主 要 传 播 媒 介。 4 检 测 对 象 出 入 境 交 通 工 具 、集 装 箱 、货 物 以 及 口岸 等 场 所 捕 获 的 媒 介 蚊 虫。 5 生 物 安 全 要 求 实 验 室 生 物 安 全 要 求 按 照GB 19489 及 《人 间 传 染 的病 原 微 生 物 名 录 》的 规 定 执 行。 6 器 材 与 试 剂 6.1 器 材 液 氮 罐 、冷 藏 箱 、高 速 冷 冻 离 心 机 、高压 蒸 汽 灭 菌 锅 、PCR扩 增 仪 、烘箱 、水 浴 锅 、生 物 安 全柜 、匀 浆 器 、移 液 器 、PCR反 应 管 、冻 存 管 、离 心 管 、塑料 平 皿 、镊 子 等。 1 版权所有·禁止翻制、电子发售 犛犖/犜2970 —2011 6.2 试 剂 Trizol、三氯 甲 烷 、异 丙 醇 、无 水 乙 醇 、焦碳 酸 二 乙 酯 (DEPC)、引 物 、缓 冲液 、A M V 逆 转 录 酶 、DN A 聚 合 酶 、RN A 酶 抑 制 剂等。 7 样 品 的 保 存 运 输 7.1 样 品 的 分 拣 、分 装 将 捕 获 的 蚊 虫 现 场 用 三 氯 甲 烷 熏杀 后 ,快 速 分 拣 。 若 条 件 允许 ,分 拣 过 程 应 在 简 易低 温 装 置 上 进 行 。 分 拣 后 按 类 别 装 入 适 当 的 容 器 (如 :冻存 管 、离 心 管 、塑 料 平 皿 等 ),加 贴 标 签。 标 签 内 容 至 少 包 括 以 下 信 息 :编 号 、种类 、采 集 时 间 、采 集 地 点 、采 集 人 等。 7.2 样 品 的 保 存 运 输 (物 理 法) 分 装 完 毕 的 样 品 ,尽 快 装 入 液 氮 罐 、冷藏 箱 或 其 他 适 当 的 冷 冻 (冷 藏 )装 置 ,尽 早 送 实 验 室 处 理。 若 采 样