文本描述
版权所有·禁止翻制、电子发售 中 华 人 民 共 和 国 出 入 境 检 验 检 疫 行 业 标 准 犛犖/犜2757 —2011 植 物 线 虫 检 测 规 范 犚狌犾犲狊犳狅狉 犱犲狋犲犮狋犻狅狀 狅犳狆犾犪狀狋狆犪狉犪狊犻狋犻犮狀犲犿犪狋狅犱犲狊 20110225 发 布 20110701 实 施 中华人民共和国 国家质量监督检验检疫总局 发布 犛犖/犜2757 —2011 版权所有·禁止翻制、电子发售 前 言 本 标 准 按 照 GB/T1.1—2009 给 出 的 规 则 起 草 。 本 标 准 由 国 家 认 证 认 可 监 督 管 理 委 员 会 提 出并 归 口。 本 标 准 负 责 起 草 单 位 :中 华 人 民 共 和 国 辽宁 出 入 境 检 验 检 疫 局。 本 标 准 参 加 起 草 单 位 :中 华 人 民 共 和 国 北京 出 入 境 检 验 检 疫 局 、中 华 人 民 共 和 国 宁 波 出 入 境 检 验 检 疫 局。 本 标 准 主 要 起 草 人 :李 俊 环 、江丽 辉 、顾 建 锋 、彭金 火 、姜 莉 、姜丽 、王 有 福 、汪 万春 、付 海 滨 、侯 浩、 闫 超 杰。 Ⅰ 犛犖/犜2757 —2011 版权所有·禁止翻制、电子发售 植 物 线 虫 检 测 规 范 1 范 围 本 标 准 规 定 了 进 出 境 植 物 线 虫 的 检 测 规 范。 本 标 准 适 用 于 进 出 境 植 物 及 植 物 产 品 、媒介 昆 虫 、土 壤 及 栽 培 介 质 中 线 虫 的 检 疫 鉴 定。 2 规 范 性 引 用 文 件 下 列 文 件 对 于 本 文 件 的 应 用 是 必 不 可 少 的 。 凡 是注 日 期 的 引 用 文 件 ,仅 注 日 期的 版 本 适 用 于 本 文 件 。 凡 是 不 注 日 期 的 引 用 文 件 ,其 最 新 版 本 (包括 所 有 的 修 改 单 )适 用 于 本 文 件。 GB/T27402 实 验 室 质 量 控 制 规 范 植 物 检 疫 SN/T1724 进 境 针 叶 树 原 木 、木 制 品 和 木 质 包 装 材 料 中 松 材线 虫 的 检 疫 操 作 规 程 SN/T1848 植 物 有 害 生 物 鉴 定 规 范 3 原 理 利 用 线 虫 趋 水 性 和 重 力 作 用 、浮 力 作 用 ,将线 虫 从 寄 主 植 物 、土 壤 或 栽 培 介 质 、包 装 材 料 等 中 分 离 出 来 ,根 据 形 态 特 征 ,结 合 生 物 学 、分子 生 物 学 等 方 法 ,判 定 其 种 类。 4 仪 器 用 具 和 试 剂 4.1 仪 器 生 物 显 微 镜 (100 × ~ 1 000 × )、体 视 显 微 镜(10 × ~ 80 × )、培 养 箱 、低 速 离心 机 (1 000 r/min~ 5 000 r/min)、超净 工 作 台 、水 浴 锅 、恒 温 箱 、控 温 电热 平 板 、胞 囊 漂 浮 器 、冰 箱。 4.2 用 具 木 工 锯 或 电 锯 、斧 头 、解 剖 刀 、解剖 针 、剪 刀 、镊 子 、分离 筛 (10 目 ~ 20 目 、60目 ~ 100 目 、325目 ~ 400 目 、500 目 )、研钵 、线 虫 滤 纸 、纱 布 、漏 斗 、浅 盘 、改 进贝 曼 漏 斗 、乳 胶 管 、夹 子 、吸管 、烧 杯 、三 角 瓶 、蒸 发 皿 或 培 养 皿 、载 玻 片 、盖 玻 片 、凹玻 片 、酒 精 灯 、试 管 、指 形 管 、打 孔 器 、干 燥 器 、记 号 笔、毛 刷 、毛 笔 、玻 璃 纤 维 丝 、自 制 线 虫 挑 针。 4.3 试 剂 40 % 甲 醛 、三 乙 醇 胺 、甘 油 、冰 乙 酸 、蔗 糖 溶 液 (484 g 蔗 糖 :1 L 蒸馏 水 )、高 岭 土 、石 蜡 、凡 士 林 、乙醇 (浓 度 70 % 、95 % 、100 % )、苦 味 酸 、中 性 树 胶 、指甲 油 、阿 拉 伯 树 胶 、丁香 油 、45 % 乳 酸 、40 % 过 氧 化 氢、 马 铃 薯 葡 萄 糖 琼 脂 、水 琼 脂。 5 实 验 室 检 测 5.1 样 品 的 前 处 理 5.1.1 植 物 组 织 将 植 物 材 料 (根 、茎 、果 实 等 )切成 小 段 或 薄 片 (厚 度 < 0.5 cm ),或将 种 子 等 较 小 的植 物 组 织 碾 碎, 1 犛犖/犜2757 —2011 待 测。 版权所有·禁止翻制、电子发售 5.1.2 土 壤 及 栽 培 介 质 将 从 植 物 材 料 和 运 输 工 具 上 收 集 到 的 土 壤 或栽 培 介 质 混 匀 ,作 为 待 测 样 品。 5.1.3 媒 介 昆 虫 将 媒 介 昆 虫 的 整 体 或 部 分 虫 体 放 入 小 钵 中 研碎 ,加 水 浸 泡 后 直 接 在 体 视 显 微 镜 下 检 测。 5.1.4 原 木 、木 制 品 和 木 质 包 装 材 料 将 原 木 、木 制 品 和 木 质 包 装 材料 制 成 小 木 条 或 木片 (厚 度 < 0.5 cm )作为 待 测 样 品 。 具 体 可参 照 SN/T1724 。 5.2 线 虫 分 离 线 虫 分 离 方 法 参 见 附 录A。 根 据 抽 取 的 样 品 类 别 、数 量 或 质 量 ,可 能携 带 的 线 虫 种 类 ,选 取 附 录 A中 一 种 合 适 的 分 离 方 法 进 行 分 离 。 为 提 高 检 出 率 ,各 种 分 离 方 法 可 以 结 合使 用。 5.3 线 虫 标 本 制 作 分 离 获 得 的 线 虫 ,根 据 具 体 情 况 ,可 以制 作 临 时 玻 片 或 永 久 玻 片 来 进 行 线虫 的 鉴 定 。 一 般 情 况 下, 为 快 速 鉴 定 线 虫 ,常 制 作 临 时 玻 片 进 行 观察 ;如 需 进 一 步 观 察 、鉴 定 或 检 出 的 重要 线 虫 种