文本描述
版权所有·禁止翻制、电子发售 中 华 人 民 共 和 国 出 入 境 检 验 检 疫 行 业 标 准 犛犖／犜１４５４ —２０１１ 代 替 ＳＮ／Ｔ１４５４ —２００４ 马 立 克 氏 病 检 疫 技 术 规 范 犙狌犪狉犪狀狋犻狀犲 狆狉狅狋狅犮狅犾犳狅狉 犕犪狉犲犽’ 狊犱犻狊犲犪狊犲 ２０１１０５３１ 发 布 ２０１１１２０１ 实 施 中华人民共和国 国家质量监督检验检疫总局 发布 版权所有·禁止翻制、电子发售 犛犖／犜１４５４ —２０１１ 前 言 本 标 准 按 照 ＧＢ／Ｔ１．１—２００９ 给 出 的 规 则 起 草 。 本 标 准 代 替 ＳＮ／Ｔ１４５４ —２００４ 《鸡马 立 克 氏 病 病 毒 分 离 与 鉴 定 方 法》。 本 标 准 与 ＳＮ／Ｔ１４５４ —２００４相 比 ，主 要 技 术 变 化 如 下： ——— 加 入 了 临 床 诊 断 内 容； ——— 琼 脂 免 疫 扩 散 实 验 的 内 容。 本 标 准 由 国 家 认 证 认 可 监 督 管 理 委 员 会 提 出并 归 口。 本 标 准 起 草 单 位 ：中 华 人民 共 和 国 陕 西 出入 境 检 验 检 疫局 、中 华 人 民 共和 国 山 西 出 入 境检 验 检 疫 局。 本 标 准 主 要 起 草 人 ：马 玉 玲 、蒋 宏 伟 、陈茂 盛 、巩 红 霞 、米 敬 斌 、高 建 新。 本 标 准 所 代 替 标 准 的 历 次 版 本 发 布 情 况 为： ——— ＳＮ／Ｔ１４５４ —２００４ 。 Ⅰ 版权所有·禁止翻制、电子发售 犛犖／犜１４５４ —２０１１ 马 立 克 氏 病 检 疫 技 术 规 范 １ 范 围 本 标 准 规 定 了 马 立 克 氏 病 的 检 疫 技 术 要 求。 本 标 准 适 用 于 马 立 克 氏 病 的 流 行 病 学 调 查 和口 岸 检 疫。 ２ 规 范 性 引 用 文 件 下 列 文 件 对 于 本 文 件 的 应 用 是 必 不 可 少 的 。 凡 是注 日 期 的 引 用 文 件 ，仅 注 日 期的 版 本 适 用 于 本 文 件 。 凡 是 不 注 日 期 的 引 用 文 件 ，其 最 新 版 本 （包括 所 有 的 修 改 单 ）适 用 于 本 文 件。 ＧＢ／Ｔ６６８２ 分 析 实 验 室 用 水 规 格 和 试 验 方 法 ３ 缩 略 语 下 列 缩 略 语 适 用 于 本 文 件。 Ｍ Ｄ （ｍａｒｅｋ ’ｓ ｄｉｓｅａｓｅ）：马 立 克 氏 病 Ｍ ＤＶ （Ｍ Ｄ ｖｉｒｕｓ）：马 立 克 氏 病 病 毒 ＣＥＦ （ｃｈｉｃｋ ｅｍｂｒｙｏｆｉｂｒｏｂｌａｓｔｓ）：鸡 胚 成 纤 维 细 胞 ＤＥＦ （ｄｕｃｋ ｅｍｂｒｙｏｆｉｂｒｏｂｌａｓｔｓ）：鸭胚 成 纤 维 细 胞 ＳＰＦ （ｓｐｅｃｉｆｉｃ ｐａｔｈｏｇｅｎ ｆｒｅｅ）：无特 定 病 原 体 动 物 （ｃｙｔｏｐａｔｈｉｃ ｅｆｆｅｃｔ）：细 胞 病 变 ＣＰＥ ４ 临 床 诊 断 与 判 定 标 准 ４．１ 特 征 性 发 病 症 状 在 鸡 群 中 ，临 床 症 状 表 现 为 步 态 不稳 、共 济 失 调 ，一 肢 或多 肢 的 麻 痹 或 瘫 痪 ，并且 两 腿 前 后 伸 展 呈 “劈 叉 ”姿 势 时 ，一 般 可 作 为 的 示 病 症 状 ，可 初 步 判 定 为Ｍ Ｄ。 Ｍ Ｄ ４．２ 特 征 性 病 理 变 化 ４．２．１ 神 经 型 的 病 理 变 化 为 腰 荐 神 经 丛 、坐 骨 神 经 丛 、臂神 经 丛 、颈 部 迷 走 神 经 丛 等 部位 肿 胀 ，呈 半 透 明 水 肿 样 ，色 泽 变 淡 ，横 纹消 失 ，其 肿 胀 程 度 一 般 为 正 常 神 经的 ２ 倍 ～ ３ 倍 ，且 多 为 不 对 称 性 ，通 过 比 较 对 侧 神 经 将 有 助 于 判 定。 ４．２．２ 皮 肤 型 的 病 理 变 化 为 以 皮 肤 的 羽 毛 囊 为 中 心 ，形 成半 球 形 隆 起 的 肿 瘤 ，其 表 面 有时 可 见 鳞 片 状 棕 色 痂 皮。 ４．２．３ 眼 睛 特 征 性 病 理 变 化 是 淋 巴 细 胞 浸 润 虹 膜 而 导 致 的病 理 变 化 ，虹 膜 呈 环 状 或 斑 点状 褪 色 ，出 现 淡 灰 色 ；瞳 孔 不 规 则 ，有 时 偏 向 虹 膜 一侧。 １ 版权所有·禁止翻制、电子发售 犛犖／犜１４５４ —２０１１ ５ 实 验 室 诊 断 ５．１ 琼 脂 免 疫 扩 散 试 验 （犃犌犐犇 ） ５．１．１ 器 材 和 试 剂 ５．１．１．１ 孔 径 ４ ｍ ｍ 打 孔 器 、直 径９０ ｍ ｍ 平 皿 、５ μＬ ～５０ μ微 量 移 液 器 和 微 量 吸 头 、量 桶 、吸 管等。 Ｌ ５．１．１．２ １％硫 柳 汞溶 液 ：硫 柳 汞 １ ｇ，蒸 馏 水 １００ ｍＬ ，溶解 后 置 玻 璃 瓶 盖 塞 备 用。 ５．１．１．３ ０．０１ｍｏｌ／Ｌ磷 酸 盐 缓 冲 液 （ｐＨ７．４）：配制 见 附 录 Ａ 。 实 验 用 水 应 符 合ＧＢ／Ｔ６６８２ 要 求。 ５．１．１．４ 抗 原 和 标 准 阳 性 血清 ：由 指 定 单 位 提 供 ，按 说 明 书 使 用。 容 量 的 三 角 瓶 中 分 别 加入 ５．１．１．５ 琼 脂 板 的 制 备 ：在２５０ ｍＬ ｐＨ ７．４磷 酸 盐 缓 冲液 １００ ｍＬ 、琼 脂 糖 １ ｇ、氯 化 钠 ８ ｇ。 将 三 角瓶 在 水 浴 中 煮 沸 使 琼 脂 糖 充 分 融 化 ，再 加 入 １％硫 柳 汞 １ ｍＬ ，混 合 均 匀 ，冷 却 至 ４５ ℃ ～５０℃ ，将 洁 净 干 热 灭 菌 的 直 径 为 ９０ｍ ｍ 的 平 皿 置 于 平 台 上 ，每 个 平 皿 加 入 １８ ｍＬ～ ２０ ｍＬ 。加 盖 待 凝 固 后 ，把 平 皿 倒 置
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