ICS67.100.01 X16 中华人民共和国农业行业标准 NY/T 2070-2011 牛初乳及其制品中免疫球蛋白lgG的测定 分光光度法 Determination of immunoglobulin G in bovine colostrum and its products—Spectrophotometry 2011-09-01发布2011-12-01 实施 中华人民共和国农业部 发布   NY/T2070-2011 前言 本标准按照 GB／T 1.1—2009给出的规则起草。 本标准由中华人民共和国农业部畜牧业司提出。 本标准由全国畜牧业标准化技术委员会(SAC／TC 274)归口。 本标准起草单位：中国农业科学院农业质量标准与检测技术研究所、东北农业大学。 本标准主要起草人：邵华、金茂俊、姜瞻梅、金芬、肖航、杨锚、王静、刘宁。 Ⅰ   NY/T2070-2011 牛初乳及其制品中免疫球蛋白 IgG的测定 分光光度法 1范围 本标准规定了牛初乳及其制品中免疫球蛋白 IgG的测定方法。 本标准适用于牛初乳及其制品中免疫球蛋白 IgG的测定。 本方法检出限：0.2 mg／mL。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB／T 6682 分析实验用水规格和试验方法 3原理 试样中可溶性抗原 IgG与抗体形成可溶性免疫复合物，复合物在聚乙二醇作用下自液相析出，形成 微粒，使试液浊度发生变化，试液浊度与所含 IgG抗原量成正比，在340 nm测定免疫球蛋白IgG含量。 4试剂与材料 除非另有说明，在分析中仅使用确认为分析纯的试剂。实验用水应符合 GB／T 6682规定的二级水 要求。 4.10.01moI／L磷酸盐缓冲液(pH 7.4) 取 0.7g磷酸二氢钾(KH 2PO 4)，2.86g磷酸氢二钠(Na 2 HPO4·12H 2O)，0.20 g氯化钾(KCl)， 8.80g氯化钠(NaCl)，水溶解后调pH至 7.4，用蒸馏水定容至1000mL，置4 ℃保存。 4.24%聚乙二醇缓冲液 取 40 g聚乙二醇，加磷酸盐缓冲液(4.1)定容至1000 mL，置 4℃保存。 4.3 IgG标准贮备液 称取 0.010g IgG标准品，精确至 0.0001g，用磷酸盐缓冲液 (4.1)溶解并定容至10.0mL，摇匀。 此标准贮备液质量浓度为 1.0 mg／mL，置－18℃保存备用。 4.4 IgG标准系列溶液 取 IgG标准贮备液，用4%聚乙二醇缓冲液稀释(4.2)，配制浓度为 0.20 mg／mL、0.30 mg／mL、 0.40 mg／mL、0.50 :mg／mL、0.60 mg／mL、0.70 mg／mL和 0.80 mg／mL的 IgG标准系列溶液，临用时配制。 4.5抗 IgG抗体贮备液 取 10 mg兔抗牛IgG抗体粉剂（效价≥10000）溶于 2 mL的磷酸盐缓冲液 (4.1)中，每管分装成 100μL，置-18℃保存备用。 4.6抗 IgG抗体稀释液 取 100 μL的抗体贮备液，加入4.9 mL的聚乙二醇缓冲液(4.2)，将抗体稀释50倍。临用时配制。 5仪器与设备 5.1 5.2 紫外分光光度计，340 nm，配有微量比色皿。 微量移液器。 1