ICS11.220 B 41 DB34 安徽省地方标准 DB 34/T 2410—2015 鸭坦布苏病毒抗体检测技术规程 Technical Regulation for Detection of Antibody against Duck Tembusu Virus 2015-07-14发布 2015-08-14实施 安徽省质量技术监督局发 布   DB34/T 2410—2015 前言 本标准按 GB/T 1.1-2009 给出的规则起草。 本标准由安徽省农业委员会提出。 本标准起草单位：安徽农业大学动物科技学院、安徽省动物疫病预防与控制中心、宣城市动物疫病 预防与控制中心。 本标准主要起草人：王桂军、朱良强、耿照玉、占松鹤、刘红梅、祁克宗、程帮照、刘雪兰、徐前 明、王军、周迎春、张永宜。 I   DB34/T 2410—2015 鸭坦布苏病毒抗体检测技术规程 1范围 本标准规定了应用琼脂免疫扩散技术检测鸭坦布苏病毒抗体的方法。 本标准适用于鸭坦布苏病毒的抗体检测，用于对该病的诊断、检疫和疫情监测。 2检测材料 2.1试验仪器 ——电子天平（0.001 g） ——微波炉 ——37℃恒温培养箱 ——琼脂凝胶梅花打孔器 ——移液器 2.2TAE缓冲液（50×）： a)经基甲基氨基甲烷（Tris) b)冰乙酸 242 g 57.1 mL c)0.5 mol/L 乙二铵四乙酸二钠溶液（pH 8.0) d)灭菌双蒸水 100 mL 加至 1000 mL e)用时用双蒸水稀释 50 倍，配制成 1×TAE 缓冲液。 2.3标准抗原和阳性血清 鸭坦布苏病毒琼脂扩散抗原由坦布苏病毒病毒安徽分离株 AH-F10 株（CCTCC V201213）经甲醛灭 活制备而成。 阳性血清由坦布苏病毒病毒安徽分离株 AH-F10 株（CCTCC V201213）制备油佐剂灭活制剂免疫健 康鸭，分离血清制备而成。 3检测 3.1采血 用一次性注射器从待检鸭翅静脉无菌采血 2 ml。 3.2分离血清 静止血样，待血液凝固后，离心，分离上层血清待检。 3.3琼脂糖凝胶板的制备 1