ICS65.020 B16 DB14 山西省地方标准 DB14/T1128—2015 苹果树腐烂病抗病性鉴定技术规程 2015-12-20发布 2016-01-20实施 山西省质量技术监督局 发布  DB14/T1128—2015 目??次 前言.....................................................................................................................................................................II 1范围.................................................................................................................................................................1 2规范性引用文件.............................................................................................................................................1 3术语和定义.....................................................................................................................................................1 4接种体制备.....................................................................................................................................................2 5室内抗病性鉴定.............................................................................................................................................3 6抗病性评价.....................................................................................................................................................3 附录A（资料性附录）苹果树腐烂病菌鉴定方法.......................................................................................5 附录B（资料性附录）苹果树腐烂病鉴定结果记载表...............................................................................7 I  DB14/T1128—2015 前??言 本标准按照GB/T 1.1-2009给出的规则起草。 本标准由山西省农业科学院提出并归口。 本标准起草单位:山西省农业科学院植物保护研究所、山西新科丰农业科技有限公司。 本标准主要起草人：赵晓军、殷辉、周建波、张志斌、秦楠、姚众、杜恩强、任海宝。 II  DB14/T1128—2015 苹果树腐烂病抗病性鉴定技术规程 1范围 本标准规定了苹果树腐烂病抗病性鉴定的术语和定义、接种体制备、室内抗病性鉴定及调查方抗病 性评价。 本标准适用于苹果树各个品种及砧木对苹果树腐烂病的室内抗性鉴定。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。 凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 NY/T 1318农作物种质资源鉴定技术规程苹果 3术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3.1 抗病性 植物体所具有的能够减轻或克服病原物致病作用的可遗传的性状。 3.2 人工接种 在适宜条件下，人工操作将接种体放于植物体感病部位并使之发病的过程。 3.3 抗病性评价 根据采用的技术标准判别植物寄主对特定病虫害反应程度和抵抗水平的描述。 3.4 接种体 用于接种以引起侵染的任何病原物部分，真菌的接种体可以是孢子、菌核或菌丝。 3.5 潜育期 1  DB14/T1128—2015 病原物侵染寄主后建立寄生关系开始，到出现明显症状为止的这一时期。 3.6 病情指数 将普遍率和病害严重度相结合，用一个数值全面反映植株群体发病程度，具体按公式（1）计算。 DI ? ??N ?I? ?100 .......................................................................(1) I M?9 式中： DI——病情指数； NI——各级发病枝条数； I——相对应的严重度级数值； M——调查总枝条数。 4接种体制备 4.1病原菌分离纯化、保存及扩繁 4.1.1培养基 马铃薯葡萄糖琼脂培养基：马铃薯200 g，葡萄糖20 g，琼脂20 g。将马铃薯去皮、切成小块，用蒸 馏水煮沸30 min，纱布过滤，滤液定容至1 000 mL，加入葡萄糖和琼脂，121℃高压灭菌20 min。 水琼脂培养基：琼脂20 g，用蒸馏水定容至1 000 mL，121℃高压灭菌20 min。 4.1.2主要仪器及设备 光学显微镜、恒温培养箱、凝胶成像系统、超净工作台。 4.1.3病原菌分离方法 从病斑边缘病健交界处剪取0.5 cm×0.5 cm大小的病组织，用75%乙醇消毒90 s，然后用无菌水冲洗3 次，用灭菌滤纸将水吸干，置于PDA培养基上，28℃恒温培养箱中培养。 4.1.4病原菌纯化 4.1.4.1病原物培养 病菌分离物培养4 d以后，从菌落边缘挑取少量菌丝接种至PDA培养基上，28℃恒温培养10～15 d。 4.1.4.2制备孢子悬浮液 菌落表面形成分生孢子器后，用解剖刀将分生孢子器破碎后转移至含有1 mL无菌水的1.5 mL离心管 中，充分混匀后用2层擦镜纸过滤，用一个新的1