中华人民共和国国家标准 GB 31660.4—2019 2019-09-06发布 2020-04-01实施 食品安全国家标准 动物性食品中醋酸甲地孕酮和醋酸甲羟孕 酮残留量的测定 液相色谱-串联质谱法 National food safety standard- Determination of megestrol acetate and medroxyprogesterone acetate residues in animal derived foods by liquid chromatography-tandem mass spectrometry 中华人民共和国农业农村部 中华人民共和国国家卫生健康委员会 国家市场监督管理总局 GB 发布 前 言 本标准系首次发布。 1 食品安全国家标准 动物性食品中醋酸甲地孕酮和醋酸甲羟孕酮残留量的测定 液相色谱-串联质谱法 1 范围 本标准规定了动物性食品中醋酸甲地孕酮和醋酸甲羟孕酮残留检测的制样和液相色谱- 串联质谱测定方法。 本标准适用于猪、牛、羊肌肉、脂肪、肝脏、肾脏和牛奶中醋酸甲地孕酮和醋酸甲羟孕 酮残留量的检测。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本 适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 3 原理 试样中 残留 的 醋酸甲地孕酮和醋酸甲羟孕酮经 乙腈提取，正己烷 除 脂，混合 阳离子柱净 化，甲醇洗脱 ， 液相色谱 - 串联质谱法测定， 内 标法定量。 4 试剂与材料 除另有规定外，所有试剂均为分析纯，水为符合GB/T 6682规定的一级水。 4.1 试剂 4.1.1 乙腈（CH3CN）：色谱纯。 4.1.2 甲醇（CH3OH）。 4.1.3 甲酸（HCOOH）：色谱纯。 4.1.4 乙酸（CH3COOH）。 4.1.5 正己烷（C6H14）。 4.1.6 乙酸乙酯（CH3COOC2H5）。 4.1.7 乙酸铵（CH3COONH4）。 4.2 溶液配制 2 4.2.1 0.2mol/L乙酸铵缓冲液：取乙酸铵15.4g，加水900ml使溶解，用乙酸调pH值至5.2， 加水稀释至1000mL。 4.2.2 2%甲酸水溶液：取甲酸2mL，加水溶解并稀释至100 mL。 4.2.3 0.1%甲酸水溶液：取甲酸1mL，加水溶解并稀释至1000 mL。 4.2.4 50%甲醇水溶液：取甲醇50mL，加水溶解并稀释至100 mL。 4.2.5 30%甲醇水溶液：取甲醇30mL，加水溶解并稀释至100 mL。 4.2.6 0.1%甲酸水乙腈溶液：取0.1%甲酸水溶液20mL，加乙腈溶解并稀释至100 mL，混 匀。 4.3 标准品 4.3.1 醋酸甲地孕酮（Megestrol acetate,C24H32O4,CAS:595-33-5）、醋酸甲羟孕酮 （Medroxyprogesterone acetate,C24H34O4,CAS:71-58-9），含量均≥98.0%。 4.3.2 内标：氘代醋酸甲地孕酮（megestrol acetate-D3,C24H29D3O4），含量≥98.0%。 4.4 标准溶液制备 4.4.1 标准贮备液：取醋酸甲地孕酮、醋酸甲羟孕酮标准品各约10mg，精密称定，于100mL 棕色量瓶中，用乙腈溶解并稀释至刻度，配制成浓度为0.1 mg/mL的醋酸甲地孕酮、醋酸甲 羟孕酮标准贮备液。-20℃保存，有效期6个月。 4.4.2 内标贮备液：取氘代醋酸甲地孕酮标准品约10mg，精密称定，于100 mL棕色量瓶 中，用乙腈溶解并稀释至刻度，配制成0.1mg/mL的氘代醋酸甲地孕酮贮备液。-20℃保存， 有效期为6个月。 4.4.3 混合标准工作液：精密量取醋酸甲地孕酮、醋酸甲羟孕酮标准贮备液各0.5 mL，于 50 mL棕色量瓶中，用乙腈稀释至刻度，配制成浓度均为1 μg/mL混合标准工作液。4℃以 下避光保存，有效期1个月。 4.4.4 内标工作液：精密量取内标贮备液0.5 m