犐犆犛０７．０８０ 犃４０ ! " # $ % & ' ' ( ) * 犌犅／犜３８５０５—２０２０ !"#$%&'()*+ 犌犲狀犲狉犪犾犱犲狋犲犮狋犻狅狀犿犲狋犺狅犱狊狅犳犵犲狀犲狋犻犮犪犾犾狔犿狅犱犻犳犻犲犱狆狉狅犱狌犮狋狊 ２０２００３０６,- ２０２００３０６./ ' ( + , - . / 0 1 2 ' ( ) * 3 / 0 4 5 6 , - 前言 本标准按照ＧＢ／Ｔ１．１—２００９给出的规则起草。 本标准由全国生化检测标准化技术委员会（ＳＡＣ／ＴＣ３８７）提出并归口。 本标准起草单位：中国检验检疫科学研究院、深圳市易瑞生物技术股份有限公司、辽宁出入境检验 检疫局检验检疫技术中心、甘肃中商食品质量检验检测有限公司、广西出入境检验检疫局检验检疫技术 中心、吉林省农业科学院、上海市计量测试技术研究院、甘肃省商业科技研究所有限公司。 本标准主要起草人：付伟、王晨光、朱鹏宇、杜智欣、魏霜、朱海、洪霞、郑秋月、付辉、何海宁、李飞武、 金虹、安小苹、朱水芳、马涛、刘刚、杨光瑞、曹际娟、袁顺捷、黄文胜。 Ⅰ 犌犅／犜３８５０５—２０２０ 转基因产品通用检测方法 １范围 本标准规定了转基因产品的定性检测方法。 本标准适用于水稻、玉米、大豆、油菜、马铃薯、甜菜、苜蓿等及其加工产品中转基因成分的实时荧光 ＰＣＲ 通用检测。 本标准方法的最低检出限为０．１％（质量分数）。 ２规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 ＧＢ／Ｔ６６８２分析实验室用水规格和试验方法 ＧＢ／Ｔ１９４９５．１转基因产品检测通用要求和定义 ＧＢ／Ｔ１９４９５．３转基因产品检测核酸提取纯化方法 ＧＢ／Ｔ１９４９５．７转基因产品检测抽样和制样方法 ３术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 ３．１ １８犛狉犚犖犃基因１８犛狉犚犖犃犵犲狀犲 转录自１８ＳｒＤＮＡ，细胞核糖体的组分之一，作为植物内源基因。 ３．２ 犆犪犕犞３５犛启动子３５犛狆狉狅犿狅狋犲狉犳狉狅犿犆犪狌犾犻犳犾狅狑犲狉犿狅狊犪犻犮狏犻狉狌狊 来自花椰菜花叶病毒（犆犪狌犾犻犳犾狅狑犲狉犿狅狊犪犻犮狏犻狉狌狊，ＣａＭＶ）的３５Ｓ启动子。 ３．３ 犆犪犕犞３５犛终止子３５犛狋犲狉犿犻狀犪狋狅狉犳狉狅犿犆犪狌犾犻犳犾狅狑犲狉犿狅狊犪犻犮狏犻狉狌狊 来自花椰菜花叶病毒（犆犪狌犾犻犳犾狅狑犲狉犿狅狊犪犻犮狏犻狉狌狊，ＣａＭＶ）的３５Ｓ终止子。 ３．４ 犖犗犛终止子狋犲狉犿犻狀犪狋狅狉狅犳狀狅狆犪犾犻狀犲狊狔狀狋犺犪狊犲犵犲狀犲 来自胭脂碱合成酶基因的终止子。 ３．５ 犈９ 终止子狋犲狉犿犻狀犪狋狅狉狅犳狉犻犫狌犾狅狊犲１，５犫犻狆犺狅狊狆犺犪狋犲犮犪狉犫狅狓狔犾犪狊犲狊犿犪犾犾狊狌犫狌狀犻狋 来自豌豆核酮糖１，５二磷酸羧化酶小亚基（ｒｉｂｕｌｏｓｅ１，５ｂｉｐｈｏｓｐｈａｔｅｃａｒｂｏｘｙｌａｓｅｓｍａｌｌｓｕｂｕｎｉｔ） 基因的３′端终止序列。 ３．６ 狆犪狋基因狆犺狅狊狆犺犻狀狅狋犺狉犻犮犻狀犪犮犲狋狔犾狋狉犪狀狊犱犲狉犪狊犲犵犲狀犲 来自绿产色链霉菌（犛狋狉犲狆狋狅犿犮犲狊狏犻狉犻犱狅犮犺狉狅犿狅犵犲狀犲狊），编码膦丝菌素乙酰转移酶（ｐｈｏｓｐｈｉｎｏｔｈｒｉｃｉｎ １ 犌犅／犜３８５０５—２０２０ ａｃｅｔｙｌｔｒａｎｓｄｅｒａｓｅ，ＰＡＴ）。 注：狆犪狋基因对除草剂草甘膦（ｇｌｕｆｏｓｉｎａｔｅ）具有耐受性。 ３．７ 犘犻狀Ⅱ 终止子狋犲狉犿犻狀犪狋狅狉狅犳狆狉狅狋犲犻狀犪狊犲犻狀犺犻犫犻狋狅狉Ⅱ 来自马铃薯蛋白酶抑制剂Ⅱ（ｐｒｏｔｅｉｎａｓｅｉｎｈｉｂｉｔｏｒⅡ，犘犻狀Ⅱ）的终止子。 ３．８ 犚犫犮犛４ 启动子狆狉狅犿狅狋犲狉狅犳狉犻犫狌犾狅狊犲１，５犫犻狆犺狅狊狆犺犪狋犲犮犪狉犫狅狓狔犾犪狊犲狊犿犪犾犾狊狌犫狌狀犻狋１犃 来自拟南芥核酮糖１，５二磷酸羧化酶／加氧酶小亚基１Ａ（ｒｉｂｕｌｏｓｅ１，５ｂｉｐｈｏｓｐｈａｔｅｃａｒｂｏｘｙｌａｓｅ ｓｍａｌｌｓｕｂｕｎｉｔ１Ａ，犚犫犮犛４）编码基因的启动子。 ３．９ 犇犃犛４０２７８５′边界序列５′犲狀犱犲狏犲狀狋狊狆犲犮犻犳犻犮狊犲狇狌犲狀犮犲狅犳犇犃犛４０２７８ ＤＡＳ４０２７８转化体外源插入片断５′端与玉米基因组的连接区序列。 注：该序列包括外源插入片段的部分载体序列和玉米基因组的部分序列。 ３．１０ 犇犘３０５４２３３′边界序列３